摘要：[目的]建立并优化柽柳cpSSR-PCR反应体系和反应条件。[方法]对影响PCR反应的5个变量(Mg^2+浓度、dNTPs浓度、TaqDNA聚合酶浓度、引物浓度、模板DNA浓度)进行L16(45)正交试验设计,并对引物退火温度进行梯度筛选。[结果]最优反应体系:Mg^2+2.0mmol/L、dNTPs0.125mmol/L、TaqDNA聚合酶0.25U、引物0.25μmol/L、模板DNA20ng,共10μL。反应程序:94℃预变性4min;94℃30s,引物退火温度30s,72℃30s,30个循环;72℃延伸10min。[结论]该反应体系成功扩增1个柽柳天然群体的23个个体,为柽柳群体扩散路线的确定奠定基础。

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