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类芽孢杆菌环果寡糖糖基转移酶的分离纯化和酶学性质

马俊; 刘思敏; 唐文竹 大连工业大学生物工程学院; 辽宁大连116034
菊糖   环果寡糖糖基转移酶   分离纯化   性质研究  

摘要:采用硫铵沉淀、疏水层析和DEAE离子交换层析对产自类芽孢杆菌Paenibacillus sp.Lfos16的环果寡糖糖基转移酶(Cycloinulooligosaccharide Fructanotransferase,CFTase)进行分离纯化,得到电泳纯的CFTase,最终纯化倍数为13.9,比活力为33.3 U/mg。纯化的CFTase经SDS-PAGE和Native-PAGE电泳分析得出其相对分子量大小约为120 000,且是双亚基蛋白。探究了CFTase的酶学性质,最适反应条件为:40℃~45℃,pH 7.0;温度稳定范围为30℃~45℃,pH稳定范围为5.0~9.0。并对CFTase降解菊糖的催化机制进行了分析,初步确定为外切加环化作用形成环果寡糖。

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