摘要:为获得J亚群禽白血病病毒(ALV-J)囊膜蛋白gp85和兔IgGFc的融合蛋白,通过腺病毒表达系统融合表达ALV-JSUJ和兔IgGFc(rIgGFc)基因。将pcDNA31-SUJ-rIgGFc用XhoⅠ、KpnⅠ进行双酶切,获得SUJ-rIgGFc基因,将其克隆至pShuttle-CMV质粒,构建穿梭载体pShuttle-CMV-SUJ-rIgGFc,重组质粒转化含pAdeasy-1的BJ5183-AD-1感受态细胞,获得重组腺病毒质粒pAd-SUJ-rIgGFc,最后转染人293T细胞。表达的融合蛋白可被ALV-J单克隆抗体JE9以及羊抗兔IgG识别,重组蛋白的分子量大小约95×104,且与JE9及羊抗兔IgG都有很好的反应性;免疫共沉淀试验结果显示融合蛋白可与DF1细胞膜蛋白混合物反应并获得差异蛋白。该融合蛋白可与ALV-J宿主细胞蛋白发生特异性反应。
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