摘要：为观察短发夹状RNA（Short hairpin RNA,shRNA）阻断大鼠C5a受体（C5a receptor,C5aR）基因表达对抑制脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）诱导的大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E细胞）损伤的影响,将构建好的针对大鼠C5aR基因的shRNA表达质粒转染NRK-52E细胞系,经G418筛选后,形成稳定的表达C5aR shRNA的细胞系。设置空白对照组（NC组）、正常对照组（LPS组）、阴性对照组（LPS＋shRNAc组）和处理组（LPS＋C5aR-shRNA组）。采用荧光定量反转录PCR（RT-PCR）检测细胞中白介素-6（Interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子α（Tumor nec-rosis factor-alpha,TNF-α）mRNA的表达,酶联免疫吸附方法（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测细胞上清液中TNF-α、IL-6和髓过氧化物酶（MPO）活性,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。结果显示,与正常对照组和阴性对照组相比,试验组中C5aR shRNA能有效抑制炎症因子TNF-α、IL-6的释放,降低细胞凋亡率和细胞中MPO活性（P〈0.05）。可见,C5aR shRNA能显著抑制由LPS诱导的TNF-α、IL-6等炎症因子的释放,改善大鼠肾脏功能,对LPS诱导的肾脓毒症损伤有明显保护作用。

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