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野黄芩苷对苯并芘致人胚肺成纤维细胞DNA损伤的保护作用

高茜; 刘丹; 彭雷; 刘静; 罗瑛; 夭建华; 张继虹 云南省烟草化学重点实验室、云南中烟工业有限责任公司技术中心; 昆明市650221; 昆明理工大学医学院衰老与肿瘤分子遗传学实验室; 昆明市650500
野黄芩苷   苯并芘   人胚肺成纤维细胞   dna损伤  

摘要:目的探讨野黄芩苷对苯并芘(benzo[a]pyrene,B(a)P)诱导的DNA损伤的保护作用。方法①采用稳定转染抑癌基因p53-GFP质粒的p53-/-MEF细胞(p53-GFP细胞)筛选野黄芩苷等小分子化合物对p53启动子的激活情况;②将MRC-5细胞分为DMSO对照组,B(a)P处理组,B(a)P和野黄芩苷共处理组,用Western印迹检测不同处理组MRC-5细胞中p-p53(Ser15)和γH2AX的蛋白表达情况。⑧将MRC-5细胞分为DMSO对照组,B(a)P处理组,B(a)P和野黄芩苷共处理组,Western印迹检测不同处理组MRC-5细胞中凋亡相关蛋白PARP的变化。结果荧光结果显示,10μmol/L的B(a)P能够明显激活p53-GFP荧光,其中野黄芩苷和B(a)P共处理后荧光表达被明显抑制;用Western印迹检测发现,与DMSO对照组相比,B(a)P处理的MRC-5细胞中p-p53(Ser15)和γH2AX的蛋白表达增加,PARP的切割增强,而野黄芩苷和B(a)P共处理的MRC-5细胞中p-p53(Ser15)和γH2AX蛋白表达水平较B(a)P处理组明显降低,同时PARP的切割明显减弱,并且具有浓度依赖性。结论本研究采用稳定转染p53.GFP质粒的p53-/-MEF细胞初步观察到野黄芩苷可能对苯并芘诱导的DNA损伤具有保护作用。在MRC-5细胞中的进一步研究证明,野黄芩苷与B(a)P共处理能降低MRC-5中p-p53(Ser15)和7H2AX的表达水平,同时能降低凋亡相关蛋白的表达,提示野黄芩苷对苯并芘致MRC-5细胞DNA损伤具有保护作用,其机制可能与抑制DNA损伤和凋亡通路有关。

简介:《医学分子生物学》(CN:42-1720/R)是一本有较高学术价值的大型双月刊,自创刊以来,选题新奇而不失报道广度,服务大众而不失理论高度。颇受业界和广大读者的关注和好评。

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