摘要：目的从高温熬制的阿胶制品中提取微量动物源性DNA,建立并优化聚合酶链反应(PCR)方法快速鉴定阿胶中驴源性成分,建立分子生物学鉴定阿胶品质新方法。方法应用DNA纯化柱替代十二烷基硫酸钠-蛋白酶K(SDS-PK)方法中酚、氯仿等毒性较大的有机溶剂提取阿胶中驴源性基因组DNA,并对SDS-PK方法进行优化。结果提取驴源性基因组DNA最佳阿胶样本量为0.20 g,水浴消化1 h再进行DNA纯化柱处理可快速获得高质量阿胶基因组DNA,纯度均在1.70~1.80之间,可达到(187.8±0.56)ng·μL^-1。应用特异性引物进行PCR扩增、克隆、测序,与Gen Bank已登记的驴物种(MG931481.1)相似性为100%。结论本实验能在90 min内从深加工的阿胶及阿胶制品中提出动物源性基因组DN段,提取的DNA纯度和浓度能满足阿胶分子生物学鉴定的要求,建立的PCR方法可快速鉴定阿胶中驴源性成分;克隆得到驴特异性基因片段可作为鉴定阿胶真伪的标准化阳性对照,预期将广泛应用到阿胶及相关制品的质量监督工作中。

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