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玉米热激转录因子基因ZmHsf25的克隆、特性与耐热性功能分析

赵立娜; 段硕楠; 张华宁; 郭秀林; 李国良 河北省农林科学院遗传生理研究所、河北省植物转基因中心重点实验室; 河北石家庄050051; 河北师范大学生命科学学院; 河北石家庄050024
玉米   热激转录因子基因zmhsf25   表达   亚细胞定位   耐热性  

摘要:植物热激转录因子(heat shock transcription factor, Hsf)对下游热激蛋白基因及耐热性相关基因的表达起关键调控作用.玉米中至少有30 个Hsf 家族成员, 其中B 族有7 个.在前期对玉米A1 亚族热激转录因子基因ZmHsf06克隆及特性、抗旱耐热性功能分析的基础上, 从玉米幼叶中克隆到B 族热激转录因子基因ZmHsf25 的完整编码序列,序列全长957 bp, 编码318 个氨基酸残基.蛋白质序列含有DNA 结合结构域、核定位信号序列和核输出信号序列, 同源分析结果显示, ZmHsf25 与高粱Sb06g025710 的相似性最高, 达92%.荧光定量分析表明, 正常生长条件下,ZmHsf25 在玉米多个组织器官中表达, 幼嫩花粉中高表达, 幼嫩根系和雌穗中表达量较低.42℃热胁迫能显著上调根系和叶片ZmHsf25 的表达, 叶片中上升幅度高于根系, 处理50 min 达到峰值; 正常条件下, 水杨酸和H2O2 处理均使根系和叶片ZmHsf25 表达下调, 而热激条件下却表现为显著上调.通过在洋葱表皮细胞中瞬时表达并观察GFP 荧光,确定ZmHsf25 定位在细胞核.通过转化酵母并进行热胁迫处理发现, 热胁迫同时降低正常和转ZmHsf25 酵母的耐热性, 但与转空载体对照相比, 转基因酵母的耐热性更强.推测ZmHsf25 参与玉米热胁迫响应和花粉的发育过程, 可能是水杨酸热激信号转导途径的下游组分.研究结果为进一步探明玉米热激转录因子家族成员的特性与功能提供了依据.

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