摘要：[目的]构建慢病毒介导的PNX沉默载体,感染GnRH分泌细胞(GT1-7)后进行筛选鉴定,获得稳定的PNX沉默细胞株。[方法]结合RNAi干扰技术构建出慢病毒沉默载体,在293T细胞中包装病毒并测定滴度。感染GnRH分泌细胞(GT1-7),嘌呤霉素筛选得到稳定细胞后利用Real-timePCR和Western blot检测PNX沉默效果。[结果]慢病毒介导的PNX沉默载体构建成功,包装的慢病毒成功感染GT1-7细胞,并且Real-timePCR和Western blot证实了PNX沉默细胞株的PNX沉默效果。[结论]成功构建了慢病毒介导的PNX沉默细胞株,为以后探索PNX对动物生殖发育的作用打下了基础。

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