病理学的基本研究方法大全11篇

病理学的基本研究方法篇（1）

中医学在我国医药卫生事业中占有十分重要的地位，辨证论治是中医学的精华和特色。自20世纪50年代中期以来，“证”一直是中医药研究领域的热点之一。由于受现代医学模式的影响，首先开展的是证本质的研究。但是，随着证本质研究的深入，暴 露的问题也越来越多。如中医证候概念的不确定、证候术语的不规范及证候诊断标准的不统一等等，使中医证本质研究的结果发生了偏差，影响了中医的学术交流和中西医之间的相互沟通与交叉渗透，使得中医学在现代社会中的应用与发展受到了很大的制约。于是，在20世纪80年代以后提出了“证候规范化研究是证本质研究的前提与基础，是中医学向现代化和科学化迈进的先决条件”的观点。正如“中医证候规范”课题的负责人之一施奠邦［1］曾指出的:中医证候规范研究的目的，是为了实现中医证候诊断的规范化、标准化，最终在科研、医疗及教学工作中都有一个“统一的标准”。围绕“统一的标准”，学者们开展了基本证型规范、复合证型规范和病证结合证型规范等大量的研究工作。然而，令人困惑的是经过规范后的一系列证候诊断标准在学术界并未达成共识，长期以来证型繁杂、标准不一的混乱状况依然存在。究其原因主要是:（1）证候诊断规范化研究的思路与方法还不够成熟和完善;（2）研究只停留在证候的静态水平上;（3）四诊资料未能实现客观化;（4）证候概念及其专业术语没有得到规范统一;（5）研究缺乏统一规划、系统设计等等。所以，笔者认为有必要对证候诊断规范化研究的思路与方法作进一步的分析探讨。

1 病证结合及以方测证是证候诊断规范化研究的主要思路

中医认为“证”是病的某一阶段的主要矛盾的概括，它受病的基本矛盾的干扰，两者之间存在不可分割的联系。因此，证候诊断离不开具体疾病的诊断，证候诊断的规范化研究应采用病证结合的研究思路，这样才能对疾病过程中各个发展阶段的证候作出正确的诊断，才能将中医的证候演变规律更清晰地凸现出来。由于相对于中医学病名而言，西医学病名往往诊断明确，机制比较清晰，所以应选择西医诊断明确，而中医治疗有优势，又严重威胁人类健康的临床常见病和多发病，采用西医辨病，中医辨证，以病为经，以证为纬，病证结合的研究思路。“方”与“证”密切相关，方由证立，证随方名，方能测证，证能验方。很多有效的经方、名方是结合了中医理论精华和长期临床实践经验配伍而成，与其特定的证候有较明确的对应关系。而且，临床疗效是临床医学的核心和关键问题，证候分类在一定程度上应建立在方剂疗效观察的基础上，通过以方测证还可以对“证”进行动态的研究。所以，有课题组提出“以候为证，以象为素，病证结合，方证相应，是建立辨证方法新体系的依据”［2］;也有学者提出“围绕证候病机及其与疾病和方剂的相关性这一中医证候研究的重要科学问题，突出中医学思维特征与现代科学设计融合的研究思路，以方剂干预治疗效果作为比较参照系统，基于中医以方测证的逆向思维的认‘证'方法，不断积累、完善，由此构建出具有坚 实临床科学基础的证候标准，应该是病证结合研究的重要发展方向之一”［3］。但是，近10多年来，由于对“方证相对”的理解存在歧见，故有学者提出“以方测证”作为一种证候研究的方法并不可行。有的认为:每个汤方都有相对应的证，只要有此证即可用此汤方，常称为“汤证”，汤证（方剂辨证）不同于八纲、病因和脏腑辨证，是指以汤辨证，相符即可应用，其实质是找出汤方的适应证［4］。有的引用柯韵伯《伤寒来苏集》的话说:“合是证便用是方”，即某证只能用某方，某方只能治某证，处方用药必须与病证对应，才能取得最佳的临床效果［5］。这种观点后来被研究《伤寒论》的学者们继承下来，被概括为“有是证用是方”。持有这种观点的学者们认为“方证相对”及“以方测证”不能对“同证异方、同方异证”的现象作出合理的解释，应改称为“方证相关”。还有学者认为“方证相对”应理解为“对症治疗”、“方病相对”等等。朱邦贤教授在分析上述观点后则提出，中医所讲的“方证相对”是指方剂的药物组成与配伍，与其主治病证所内寓的基本病机具有高度的针对性或相关性［6］。应当明确的是，“方证相对”中的方证或汤证，是指某方与某一特定病证间所存在的直接对应的主治关系，这一关系是建在该方内涵的“理”（该组方所针对的基本病机）和“法”（根据基本病机所确立的治疗大法或具体治则）之上的。笔者是这样认为的:“方”与“证”密切相关，如朱教授所述两者是通过理与法相关联，但由于关联的程度不同，可以是多方对应于一证，也可以是一方与多证对应，其对应的程度取决于临床疗效，所以，根据临床疗效可以求得最佳对应的方证，以最佳对应的“方”来测最佳对应的“证”，这是目前证候诊断规范化研究的主要思路。

2 在文献调研、专家咨询及病例回顾的基础上，遵循临床流行病学原则，进行多中心、大样本的临床前瞻性研究，运用循证医学的研究方法对证候诊断标准进行系统评价和完善，是证候诊断规范化研究的重要途径

病理学的基本研究方法篇（2）

2心血管内科学研究生临床规范化培训教学目标及模式

心血管内科学专业学位研究生，除了第一学期为期半年的研究生课程学习外，其他时间均在临床参加临床训练。心内科硕士研究生要求完成8个月的内科二级学科（呼吸内科、消化内科、肾内科和内分泌科）基础培训，还要完成10个月的心血管内科专科培训。在专科培训期间，明确硕士研究生规范化培训的目标，探讨适宜的培训模式对培养具有较强的临床分析能力，能独立处理本学科领域内的常见病、多发病高素质专科临床医生有重要意义。

2.1心血管内科学研究生专科临床规范化培训教学目标

①心血管内科研究生必须熟练掌握心血管内科的基础理论知识，包括循环系统解剖，常见心血管疾病病理、生理及其发病机制。②心血管内科研究生必须熟练掌握心血管内科基本操作技术，包括心电图仪、心电监护仪、电除颤仪。熟练掌握体格检查及心脏听诊、熟练分析心电图、生化、胸片、超声心动图、冠状动脉CT及冠状动脉造影结果，并熟练掌握心血管疾病危重患者的监护手段。③掌握心血管内科常见疾病诊断和治疗及心血管疾病危急危重症的诊断和处理。

2.2心血管内科学研究生专科临床规范化培训的教学模式

2.2.1重视基本理论、知识、技能学习上述本科招收的心血管内科学研究生虽然医学基础知识扎实，但其心血管内科专业理论知识相对缺乏，且大多数缺乏临床工作经验及临床基本技能操作经验。通过临床培训，使其具有独立诊断和处理心血管内科常见病及心血管急症的能力，达到心血管内科医生高年资住院医师或主治医师水平。首先从培养三基（基本知识、基本理论和基本技能）做起，同时注重临床思维的培养[5]。结合临床，每周开展一次心血管内科常见疾病的理论教学、心血管内科基本技能操作培训，结合临床典型病例开展一次教学查房。培养“三基”水平过硬的临床研究生，使研究生的理论知识掌握得更加牢固，基本临床技能更熟练。

2.2.2一对一带教、分阶段培养由高年资主治医师或副主任医师一对一带教，采取分阶段分步骤的培养方式。第一阶段：临床前培训，时间为2周，熟悉环境，掌握心血管内科基本操作，包括心电图仪、心电监护仪、电除颤仪操作，熟练掌握心脏听诊、规范的病历及各种医疗文书的书写。第二阶段：临床实习培训，时间为6周，在带教老师带领下，接诊心内科普通病房住院患者及住院患者的诊断、治疗及完成医疗文书的书写，并在老师带领下一线病房值班。初步掌握辅助检查，包括心电图、生化、胸片、超声心动图、冠状动脉CT及冠状动脉造影结果的分析。第三阶段：普通病房临床培训，时间为3个月，掌握心内科常见病的诊断及治疗，熟练心血管内科基本操作。独立接诊心内科普通病房住院患者及住院患者的诊断及治疗，独立完成心内科普通病房一线值班。第四阶段：重症监护室临床培训（心内科重症监护病房轮转），时间为3个月，掌握心血管内科危急重症的处理。第五阶段：夯实临床培训，时间为2个月，完成前四个阶段的专科培训后，由科室专家组对研究生进行心血管内科“三基”及临床思维和能力考核，发现问题，查漏补缺，进一步夯实临床培训，以培养基本理论、基本知识过硬，临床专业基本技能熟练的具有高年资住院医师专业水平的研究生。

2.2.3教学模式①研究生带教老师的要求：研究生带教老师在临床诊疗过程中根据患者的病情，向研究生讲解相关疾病的病因、流行病学、发病机制、临床表现、体征、辅助检查、诊断、鉴别诊断、治疗原则、并发症及处理措施，同时研究生在实际临床工作中培养临床思维提高临床专业水平。②“三级医师负责制”在研究生教学中应用：依据“三级医师负责制”原则，科室每日安排主管医师或主诊医师查房制度，查房过程中由研究生汇报病历，就临床诊疗过程中遇到的问题进行详细地分析、讲解，培养其临床思维及分析问题、解决问题的能力。使研究生掌握对心血管内科常见病、多发病的诊断及治疗。③由研究生主动参与的教学查房：每周一次科室教学查房，提前2d告知病例，查房前要求研究生对患者的病情、诊治经过进行前面分析，并且要求研究生查阅教材、文献，先自己学习，发现问题，带着问题参与教学查房。此外，主持教学查房的专家，首先由主管患者的研究生汇报病例，并总结病例特点，分析病例诊断及诊断依据，鉴别诊断及治疗方案，之后大家讨论并提出问题，先由主管患者的研究生回答大家提出的问题，针对分析过程专家针对问题进行逐一分析，最后由专家总结并对该疾病领域的新进展、新理念、新技术进行讲解，培养其临床思路同时并对疾病的诊治及进展全面了解。

2.2.4开展“以问题为导向的教学模式”[6-7]在临床培训阶段，使学生主动参与老师指导相结合的教学方法，培养研究生独立思考能力，提高其临床实践能力。在日常临床工作中，针对病例，在临床实践中由研究生针对患者临床情况，对其诊治过程提出问题或有带教老师提出问题，学生利用所学基础理论知识和临床实践进行分析找到解决问题方法，这一过程中带教老师作为指导者分析、纠正研究生错误，研究生作为解决问题的主导者，不仅加深了对疾病诊治过程的全面理解，而且提高了研究生临床分析、解决问题的能力[8]。

病理学的基本研究方法篇（3）

病证结合的基础研究

疾病与证候相结合的模型制作则成为这一方法的瓶颈。刘丽梅等［3］以具体的病种作为载体，建立相应的病证结合动物模型，并结合现有的单因素病制备动物模型，再叠加其他与中医病因、病机相关因素制备复合病证结合动物模型。在动物实验时做到病证结合、方证相应，已成为解决这个难题的突破口。病证结合机制研究随着研究的逐步深入，病证结合的基础性研究已成为本领域的研究重点。尤其探索病证的微环境物质及其内在联系，阐明微环境与病证发生的机制的研究已成为中西医基础研究的重点，诸多发现证明了二者之间的联系。蔡小军等［4］认为，代谢组学是生物体整体功能状态的生化表型，可以用来表征中医思想中诸内，中医思想与代谢组学思想是外与内的结合。因此，代谢组学以生物体整体代谢物为研究对象，阐明整体功能状态的基本思想与中医理论的整体观是相对应的。

病证结合临床应用研究

临床疗效评价研究病证结合的医学理论，正逐渐被广大医务工作者广泛地应用于临床实践，对临床研究及治疗具有重要的指导作用［5］。首先，不断完善中医临床证候观察指标的客观化与量化。如申春悌等［6］采用设计—衡量—评价(DME)方法收集病—证的临床信息，并利用结构方程模型(SEM)及界点理论进行病—证辨证标准的研究，形成了完整的中药新药疗效评价体系。同时，多元模式的临床医疗也移入了本研究，包括目标病种选择、研究方法思考、评价标准的整体复合，从而建立增强式的病证结合，宏微观和整体局部统一的循证医学模式［7］。其次，通过临床实践丰富病证结合理论。陈大舜等［8］将2型糖尿病进行证型分析，并建立病证结合诊疗方案，将病与证有机结合，使得中西医优势互补，显著提高了临床疗效。故在开展中医药临床疗效评价时，应有针对性的设计到疗效评价指标体系中，有利于建立突显中医疗效优势的评价指标体系［9］。然而，在证的标准化、客观化研究中，存在病证孤立研究的现状［10］，这也成为研究的桎梏，促使我们进行更加深入的思考，进而完善病证结合的理论与实践的结合。方证相关研究病证结合是以证为根本，以症为参考，以病为过程，三者互参，形成的一种动态的、整体的、宏观的诊疗体系［11］，进行辨证，确定治法，组方遣药。临床实践中应遵循病证结合、方证对应，才能把握辨证论治的精髓，取得最佳的临床疗效［5］。王师菡等［12］通过引入病证结合方证对应、方证次对应、常规西药3种治疗方式，干预冠心病心绞痛，其发现方证对应治疗不仅能够改善中医临床证候积分，并从生物学基础方面诠释了病证结合方证对应的临床疗效优于方证次对应治疗及单纯西药治疗，进而将病证结合拓展至方证对应的研究思路上来。方证对应研究有利于明晰复方作用的物质基础—证。研究证病理机制，观察证—方、方—证的相互关系以进一步加强中药复方的针对性，改善方证之间所存在的特殊对应关系，对于提高中医药临床疗效有着切实意义［13］。病证结合的中西医结合研究部分学者将病的涵义扩展为西医的病。王阶等［14］认为，病证结合即西医辨病与中医辨证相结合，以借助于现代医疗检测手段、现代医学理论、思维方法对患者做出疾病诊断，在此基础上运用中医辨证思维进行辨证，确定治法，组方遣药，最终达到提高疗效的目的。故中西医学在病证结合理论上得到了有机结合。中西医在证与病之间的有机结合，是基于二者在生理和病理上的相似性。西医的诊病方法，是一种从病理解剖与病理生理学为切入点的微观诊疗方法，而中医学则是以证为根本，以症为参考，以病为过程，三者互参，形成的一种动态的、整体的、宏观的诊疗体系，即王永炎所提出的内实外虚、动态时空、多维界面［11］。故在以上2种思路的融合下，就形成了西病中证的结合模式，其涵义是以西医病的基本病机作为主线，将贯穿于相互关联的证型，病与证、证与证之间形成有机的联系［15］，从而揭示了病机演变规律，同时也反映了疾病各阶段主要矛盾。这样利用西医学的微观分析，促进和充实中医学对基本病机的认识。

病理学的基本研究方法篇（4）

在中国使用了数千年的针灸医学，目前已经被100多个国家所接受和应用，成为世界许多国家医疗卫生的组成部分。至1986年在中国采用针灸治疗的疾病有1116种，查阅统计近5年发表于国内针灸杂志上的针灸临床研究疾病病种，针灸界宣称针灸有效病症超过300种，疗效显著者有100多种。

近年中医学界开始关注迅速崛起与流行的循证医学研究，因为通过循证医学研究的临床结果可以视为真实的证据而被全球临床医生承认而广泛运用，这对推广针灸医学具有重要意义。所以许多相关介绍论文陆续发表，同时国家中医药管理局开始注重循证医学教育，并进行了专项的针灸临床研究，部分针灸诊疗课题获得资金资助进行随机对照研究(RCT)并通过鉴定。但是依美国国家卫生研究院(NIH)的“循证医学”标准，针灸疗效确认为“显著”的只有不到10种病症。面对如此巨大的差异，许多针灸学者开始思考，如果继续发展下去，循证医学是促进针灸医学发展还是将束缚其发展?

笔者有幸承担了一项国家中医药管理局针灸诊疗方案研究，通过实践循证RCT研究全过程，对此产生了一些认识与看法。

1　分析目前对针灸临床研究证据的认识

针灸医学临床研究证据究竟有多可靠呢?下面是绝大部分系统评价中表明的目前针灸RCT研究中一些比较普遍的缺陷。

(1)对随机分配过程细节描述不足，分配隐藏很少被提到，且经常被错误地理解和运用；

(2)只有不到15％的随机对照试验采用了盲法，绝大多数研究未能最小程度减小操作者对结果的影响；

(3)样本量的计算很少被报道，样本量通常太小，只有很少的试验样本数大于300；

(4)研究对照组的选择不合理，有大量的试验采用的是另一种疗效未被肯定的中医或西医治疗方法作为对照组；

(5)干预措施的刺激参数通常被个人经验主观个体化，不易被扩大成一个标准的协议，重复率较低，不易临床推广；

(6)约多于一半的RCT没有报道基线的特征，或基线数据(年龄、性别等)没有被充分地罗列出来以及可能的副作用发生的不确定；

(7)只有很少的针灸疗效评价标准与国际标准一致，疗效指标很少被量化报道；

(8)试验对象的脱落和患者的依从性很少被考虑和解释，针灸疗效缺乏长期的随访论证，统计分析和试验结果的解释不准确；

(9)有相当数量的试验是以短篇报道的形式发表，其中的大多数试验宣称其验证的治疗方法是有效的，从而暗示有较普遍的发表偏倚的存在。

正是由于针灸研究具有上述缺陷，所以针对针灸研究的普遍结论是：“目前只有很少的高质量的循证医学证据表明针灸有效，由于方法学基础薄弱和可供检验的假设缺乏，所以得到一个令人信服的结论显得遥不可及。”

目前中医针灸学界领域内对此的解释是，针灸是一个与多专业应用交叉的复合型学科，现在的针灸随机对照试验忽视了针灸医学本身的一些特殊性，在不领会针灸本身特征的基础上，把一些通用的原则强加于另外一种理论体系的研究上，这种忽视其复杂性的结果使大家对针灸疗效产生错觉。临床随机对照试验可能不是发掘针灸全部潜能的科学研究方法，这种研究的结果可能并不只贬低了作为治病手段的针刺或艾灸，而是整个针灸医学。所以，国内有学者开始质疑对循证医学评价方法学全套亦步亦趋地应用于针灸医学是否合适，提出中医针灸医学的临床知识是否可以完全依照循证医学的格式去评价和审核吗?

2　实践中的困惑与疑问

针对上述问题与争论，我们在进行课题研究与实施过程中进行了相应的注意。针灸医学从严格意义上讲，其研究范围是在中医理论指导下进行的一种临床医疗行为，而并非简单的针刺体表的某一部位的一种医疗手段。一个完整的针灸医疗活动包括“理(中医的理论)、法(中医学治法)、穴(在理指导下的辨证取穴)、术(在理、穴基础上的针对性操作)”4个步骤。所以在全盘按照循证医学方法论设计临床研究及在实施过程中出现了一些困难，笔者认为这可能造成了最后结论的部分研究质疑点，包括以下几点：

(1)中医认为疾病是一个动态过程，是人体正气与邪气不断交争的表现，为此提出相对应的反映疾病动态特色的临床理论――辨证论治。而目前西医的研究方法多在遵循接受单一的病理定义，将病理改变禁锢在一个相对静态的基础上进行。如果承认疾病是一个动态变化的过程，现在借鉴的研究方法似乎不能体现疾病动态特色，具体表现在研究中很难确定标准的治疗记录。

(2)在确定纳入研究对象并随机化分组上，牺牲了中医的整体观念。中医整体观强调“天人合一”，即患者连续的病理生理和环境因素的改变引起的病理状态的改变在研究中应该被考虑。事实上，如果考虑到这些变量因素，研究就几乎不可能随机化分组，因为很少有共性的患者。纳入标准的模糊使得大多数针灸临床随机对照试验设计从一开始就可能偏离中医的理论，以致在以后的疗效评判时很难说明问题。目前几乎所有的针灸RCT纳入标准都采取两种模式，即“西医辨病”或(和)“西医辨病与中医辨证结合”，前者强调所有研究对象符合某种疾病诊断标准也就是满足疾病发生发展的基本矛盾，但此种矛盾认识基于西医理论，而治疗却依据中医理论观念；后者虽既强调研究对象符合某种疾病诊断标准也就是满足疾病发生发展的基本矛盾(西医)，同时也强调了疾病发生发展的现阶段主要矛盾(中医)，但基本矛盾与主要矛盾认识的起点不一致，可能无法有交叉结合点，这种研究模式结论事实上并没有客观划定这种治疗方案自身的适用边界，它究竟能治哪些疾病。因此这种模式虽然强调了中西医学各自的特色，但事实上并不能提高针灸临床研究质量，进而提供高质量的临床证据。

(3)几乎也不可能有双盲的使用。一般来说，在一项针刺治疗过程中很难使针灸医生和患者实现双盲。事实上，针灸医生应该清楚患者真实的病情并给予相应的治疗以取得最佳疗效。如果使针灸操作者处于盲态则可能使操作者本应该知道的必要的信息来源无法得到而不能采取正确的辨证施治，这可能不符合医学伦理学要求。

(4)过度的标准化操作可能使针灸治疗作用失去更多。因为忽视了或者没有深入研究操作者的背景技术和个性特征，事实等于忽视了针灸治疗中的“治神”特点，这对治疗结果有着重要影响。同时也

使许多在针灸经络腧穴理论指导下进行的医疗行为受到影响。

通过实践，以目前的循证医学方法研究针灸临床疗效，笔者也认为由于忽视了针灸医学本身的很多特性，所以可能牺牲了针灸治疗潜能从而造成目前的争论。

3　体会与建议

尽管针灸临床试验有着其方法学上的先天局限，证明针灸有效病症证据不足，但令人困惑的是低质量的研究水平却很难掩饰住每天日常临床工作中所取得的针灸医疗成就。在很容易找到针灸医学研究的缺点以后，怎样理解针灸医学而不仅仅是批评和指责。针对上述问题，笔者认为有一些问题可以通过提高针灸临床工作者的科研知识水平得到改进，如①盲法的运用，双盲不易做到，但研究结论的第三者盲法判效及公正的第三单位的统计分析可能使结论更为公正；②研究的随机分配方法、对照组选择均可以通过与专业设计人员紧密合作得到一定改善；③在进行成功的RCT研究之前推荐先期进行观察性的研究，目的是获得可靠的关于治疗类型、病例数、患者对治疗的反应以及相关的副作用，为进一步研究奠定基础，而不是从理论上推论就可以进行临床研究。

同时，笔者认为针灸医学是一门以技术特点为分类原则的多学科交叉的专科医学。由于针灸理论建立受东方哲学思想的影响，所以其理论基础不能用西医学的解剖学和生理学所解释，其对健康和疾病的认识与用现代科学技术武装起来的西方医学有很大的不同。在提高针灸研究者素质、完善基本研究方法的同时，为使针灸领域进行更趋合理的科学研究，针灸界未来应在更好地理解针灸学特性基础上在以下方面努力开展研究，探讨符合针灸医学特点的研究方法。

(1)怎样做到真正地病证结合即在中NN论指导下对疾病各种矛盾认识的统一。事实上西医细致诊断也不以辨病为自限，例如休克是综合性的病症，可以进一步区分为过敏性休克、心力衰竭性休克等，治则亦不相同。所以，积极探讨中医对疾病的基本矛盾认识，借鉴西医名词，装入中医内涵，以利于交流与推广，需要我们临床工作者对疾病进行努力探讨，以找到一个为某具体疾病的辨证方案指南。

(2)怎样才能用一个统一的标准在RCT试验中去量化各种操作方法，尤其是针刺深度的选择及刺激量的确定。由于干预措施本身的特殊性，所以针灸随机对照试验比其他干预措施研究更困难，研究方法学上更具挑战性。事实上在临床针灸治疗中，“术”是在根据中医病证统一认识的基础上确定的，一般原则“病有浮沉，刺有浅深，各至其理，无过其道。过之则内伤，不及则生外壅，壅则邪从之。浅深不得，反为大贼，内动五脏，后生大病”(《素问・刺要论》)，即是根据中医理论确定研究疾病病位是在“皮、肉、筋、脉、骨”的哪一个层次，并最终确定针刺深度及不同层次的刺激量。这种针刺深度选择，笔者认为较之目前统一规定针刺人皮多少厘米的硬性规定，更符合针灸治疗的辨证体系，更容易使中医针灸学界接受，也更体现因人制宜的中医原则。因为一个肥胖的患者与一个瘦小患者针刺同样深度最后疗效结果就可能不同。

(3)怎样评价针灸诊疗者的素质以确保所进行的是真实可靠的针灸治疗活动。针灸操作包含的不仅仅是针刺或艾灸的过程，而且还包含了患者对针灸医师的认同。笔者认为，需要尽快建立针灸住院医生与专科医生培养体系与认证体系，这将有助于推进针灸从业人员的整体内在素质，提高从业人员的针灸职业荣誉感，从而提高研究的品质。

病理学的基本研究方法篇（5）

[中图分类号] G642.0；R18 [文献标识码] C [文章编号] 1673-7210（2013）05（b）-0144-03

临床流行病学是临床医学的方法学课程，通过探讨疾病的病因、发生、发展、诊断、防治和预后的规律，为临床决策提供科学依据，被广泛地应用于临床医学的许多学科领域[1]。随着现代医学模式改变及循证医学的临床应用，临床流行病学在临床科研工作中更加显现其重要性，它是临床医学重要的基础课程和科学研究必需的方法学科，是临床医学生特别是研究生等高层次人才培养的必修科目。临床流行病学因基本概念多、授课时间有限[2]，目前教学上仍存在需要解决的问题。现为了适应教学发展需求，寻找不同层次进一步提高教学效果，本研究对某军校2008级研究生临床流行病学病因学大课的授课效果进行了初步分析。

1 对象与方法

1.1 对象

选择某军校2008级修临床流行病学学分的全体研究生进行研究，共发放调查问卷166份，完整有效143份，有效率为86.1%；其中，博士研究生126名，男84名，女42名，统招生89名，在职生37名，内科学专业44名，外科专业35名，眼、耳鼻喉、中医、护理等专业26名，辅诊专业21名；硕士研究生17名，其中，男10名，女7名，统招生13名，在职生4名，内科学专业9名，其他专业8名。

1.2 方法

授课前后采用统一的答卷对调查对象进行调查。内容包括姓名、专业、学号及10道判断题，错误判0分，正确判1分，记录总分。双人核查，对比查错。10个问题分别为：①病例对照研究属于描述性研究；②RR值又叫暴露比值比，是关联强度指标之一；③病例对照研究属回顾性研究，按暴露与否分为两组；④混杂因素与研究因素和疾病都有关联；⑤配比因素越多，研究越容易进行；⑥只要OR值>1，就可认为暴露因素与疾病有关联强度；⑦病例对照研究回忆偏倚不能避免；⑧队列研究可确定病因；⑨队列研究论证强度在流行病学研究设计中最高；⑩队列研究论按暴露与否分为两组，可计算暴露人年数。

1.3 统计学方法

2 结果

3 讨论

近年来，为了适应现代社会和经济发展对高素质人才的需求，我国研究生教育的招生规模年年扩大。据统计，2008年研究生招生人数为446 422人，2009年计划招生人数为510 953人。2010年研究生在校人数为1 538 416人，其中，硕士生1 279 466人，博士生258 950人[3]。研究生是各高校、研究机构和医疗单位科研的科研力量的主力军，他们在导师的指导下完成了科研从申报、立项、研究和结题的全过程，是科研项目主要参与者或完成人。因此，在校研究生的科研理念、科研素质和科研能力将直接影响各科研单位的科研水平，也直接影响我国社会和经济的发展水平。有研究调查了某高校医学研究生学位论文中常见的方法学问题发现，仅有1.8%的学位论文没有统计学错误[4]。即使已经正式发表的科研论文也存在着许多科研方法及统计学的错误。由此可见，提高研究生临床流行病学教学的有效性，提高研究生医学科研资料收集的质量和应用恰当统计学方法处理科研资料的能力，使学生真正掌握临床科研的基本方法，是当前研究生教学改革需要探讨的问题之一，对促进我国医学科研发展水平也具有重要意义。

现代医学模式已由传统的生物医学模式向生物-心理-社会医学模式转变，传统的治疗模式也将向群体、预防、保健和主动参与的模式转变。现代社会对医学人才的要求也越来越高，医生不但要具有广博的医学知识和丰富的临床经验，还要具有较高的科研素质和科研能力。在临床工作中发现问题，应用恰当的科研方法设计课题，收集临床资料，然后应用合适的统计学方法处理资料，最终科学地说明临床医学现象和解决提出的医学问题。临床流行病学作为一门新型的临床医学基础学科和方法学科已为医学界所重视，并愈来愈显示出其在科研和临床中的重要的作用。学习临床流行病学使研究生在今后的临床工作中能用临床流行病学的方法观察、思考和分析问题，对于提高研究生科研素质和科研能力无疑是非常有益的。

临床研究生开设临床流行病学课程的总学时为40学时，学时较少，但从2012级研究生开始，学校将该课程设定为研究生（包括硕士和博士）学位必修课，授课对象主要为临床型和部分科研型研究生，每年约600人。为了使学生更好地掌握这门科研方法学，结合临床研究生实际工作的特点，笔者从2008级研究生开始对课程内容实行逐步教学评估和改革。由于临床流行病学学时有限，为了在有限的学时内使学生达到更好的教学效果，笔者通过教学前后对学生进行问卷调查，了解哪些是学生容易理解的问题，哪些是其较难理解的问题，在以后的教学中将重点放在学生较难理解的问题上，对提高临床流行病学的教学效果将具有实际的意义。

本调查显示，博士研究生对第4、5、8题的理解授课前后差异不显著（P > 0.05）。第4题考查的是“混杂”的概念，说明在授课后学员对该概念理解仍有待加强。第5题考查的是“配比”的作用和实施方法，是对“混杂因素”的消除方法，仍是对“混杂”这个概念不清造成错误，该部分应加强。第8题错误原因可能是由于学员对病因学研究的作用理解不够全面。在今后研究生的授课中，需对这几个概念进一步加以阐述。笔者提一些设想：首先可提出一些问题，如什么是“混杂”、“病因学研究”的方法有哪些，采取以问题引导的教学模式――PBL[5]，让学生自己在书中找答案并展开讨论，教师与学生交流互动[6]等均可以借鉴，进一步调动学生自学和参与的积极性，可能更容易加深对知识点的理解和记忆[7-8]。

硕士生第5、7、10题授课前后正确率差异无统计学意义（P > 0.05），且第6、8题授课后正确率较授课前下降。第5题博士、硕士错误率均较高，说明“混杂”这个概念较难理解，硕士虽对考查其基本概念的题目完成得较好，但对其概念的延展和引申仍有待加强。第7题错误说明其对“回忆偏倚”概念不清。第10题说明硕士研究生对队列研究的分组方法及暴露人年数的概念还没有完全理解。第6题错误说明硕士研究生对OR值的理解仍有待加强。第9题硕士学员回答的正确率较授课前下降，一方面可能与例数较少有关，一方面也说明病因学研究方法今后应加强授课。

本调查发现，博士授课效果较好，硕士授课后存在问题相对较多。说明博士在经历了硕士的学习阶段后，对科研的方法和过程都有了进一步的认识和理解，而硕士缺乏科研锻炼。对此，可以尝试运用病案举例[9-10]的教学方法，例如对霍乱的研究、吸烟与肺癌、人状瘤病毒与宫颈癌的关系等，引导学生应用流行病学研究方法去探索病因，了解各相关因素在疾病发生、发展中的作用。这样可能会缩短理论内容与临床实践的差距，让原本枯燥的流行病学规律变得生动起来，形成以科研训练为经、以教学内容为纬的兼容性教学形态及情境[11]，更好地锻炼学生对临床课题进行科研设计、测量和评价的能力。

综上所述，研究生教学应针对硕士、博士对临床流行病学不同的理解程度，制定有层次的培养方式[9]。对已经掌握了一定流行病学基础的博士生，授课重点放在其容易混淆的概念和科研中用到的实际方法进行讲解。对硕士生，授课重点放在基本概念的讲述，可以尝试让学生选取不同的科研题目进行实验设计[12]，使其对科研整体思路和过程有所了解，形成完整、清晰的科研体系。突出因材施教[13-14]开展更深层次的教学，使学生的学习更具方向性和目的性将成为今后的方向。

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病理学的基本研究方法篇（6）

流行病学（ epidemiology） 作为现代医学的一门工具学科，是研究人群中疾病与健康状况的分布情况及其影响因素，并研究防治疾病、促进健康的策略和措施的科学[1]，在临床医学、基础医学和疾病预防控制领域中发挥着及其重要的作用，在中医药医学领域亦是如此。本文根据本校流行病学课程的教学实践，探讨具有中医特色的流行病学教学中存在的问题，并针对问题提出改进措施，以期提高教学质量。

1 学生对课程的重视程度不足

中医院校学生都以学习中医知识为主，认为流行病学不是他们的主干课程，因此在学习时对课程不够重视，热情不高，不会主动去学习，导致他们不能很好地掌握本课程基本知识和基本技能。近几年，世界范围内几次大的流感病毒蔓延，包括我国在内，都导致全球范围的大流行，其中让人最为惊讶的是在此次流行中很多医务人员都被感染了[2]，这足以说明了我们医生流行病学知识的匮乏。针对该现象，我们的应该从教学本身出发，改变教学理念，通过各种教学方法鼓励学生主动学习。

目前，我们对本科生的教学内容主要以总论基础理论知识讲解为主，主要介绍几种流行病学方法，比如：横断面研究、病例对照研究、队列研究及实验研究。在以后的授课中可以采用从具体事例出发，引出相应的流行病学方法，并且通过经典事件的分析学习不同方法的特点及实施步骤。在讲授病例对照研究时，可以引用比较经典的吸烟与肺癌的研究；在讲授横断面研究时，可以结合相应的现况调查（大学生网络生活知晓度调查）进行学习等等。一方面提高学生对本课程的认识程度；其次，培养学生理论结合实际的动手操作能力。

2 上课内容及课时的限制

涵盖各种专业和层次，而针对不同专业、不同培养层次的学生，讲授的内容和要求是不一样的。教师应在授课的过程中根据不同专业学生知识体系及需求的特点，制定不同的授课方案[3]。比如：流行病学做为预防医学的主干课程，学时一般安排较多，教师应重点讲授不同方法的理论思想、特点、实施步骤及应用，在此基础上，还应尽可能多安排案例分析讨论课，及时将理论知识应用于现实事件中。对于非预防医学专业学生，流行病学作为一门方法学科，在课时比较少的情况下讲授应做到重点突出，重点培养学生流行病学在科研中的应用思路，让学生通过课程的学习了解以后工作中应用流行病学的科研思路、研究内容和具体方法。

3 增加实践教学环节

流行病学作为一种方法学科，在教学中应包括理论基础知识教学和实践教学两部分。理论教学注重讲解基本概念、不同方法基本思想等；而实践教学则注重各种方法的具体应用，但目前的教育是教师偏重于理论知识讲解，不注重学生实践能力的培养，导致学生遇到实际问题，不会运用流行病学方法进行分析解决，比如：进行最简单的社会调查，学生不知道怎么去开展实施；临床上遇到比较罕见的疾病，不知道怎样运用流行病学方法去查找病因，因此，加强实践教学整个本科教学的重要环节，而实践教学本身对于提高学生的综合素质，培养学生的创新精神与实践能力具有特殊作用。流行病学实践教学环节主要以两种形式来完成：一是选取医学中经典案例课堂讨论的形式，有利于学生将理论知识与具体事件相结合，更好的巩固课堂所学知识；二是现场实践，现场实践是流行病学教学中的重要环节[4]。为了完成流行病学实践教学任务，学校和教师要做好与地方疾病预防控制中心、医院、社区及相关部门的联系工作，组织学生实地开展如个案调查、小规模的现况研究和利用现有资料进行生态学研究等现场实践教学环节。

4 考核方式的改革

流行病学是一门实践性、应用性很强的学科，在以往教学中我们多采用试卷形式进行考核，但单纯通过一份试卷很难反映学生的实际水平和能力[5]。所以我们应在考核方式上做相应的调整。整个考试可以分为两个环节：试卷基本知识点识记和具体方法应用。试卷内容应包含本门课程需要学生掌握的一些基本概念原理，还包括对经典案例中所涉及到的流行病学方法进行分析；第二部分考核内容教师可以提供多个研究题目，由学生应用所学知识写出相应流行病学设计方案（研究目的、方法、步骤、结果、偏倚的控制等等）。通过这样不但可以锻炼学生综合考虑问题的思维能力，还可以提高学生应用知识解决医学问题的实际能力。

流行病学作为预防医学专业的主干课程，同时也是为临床、护理、检验、药学等各研究部门服务的一门工具学科，在科研工作中发挥着越来越重要的作用。因此，作为流行病学的带课教师，应在不断学习中摸索出一套行之有效的教学方法，引导学生准确理解流行病学的基本原理，正确应用流行病学原理和方法解决实际问题，以期提高教学质量。

参考文献

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病理学的基本研究方法篇（7）

中图分类号：G644 文献标识码：A

相对动物学或者植物学这些传统学科，病毒学是一门始创于20世纪40年代的新兴学科。虽然在此之前，就有发现能通过细菌过滤器的烟草花叶病致病因子的科学家D.Ivanofsky，以及发现具有滤过性的口蹄疫病原的科学家Loeffler和Frosch，但是基于历史条件和知识水平的限制，人们或许观察到了病毒引起的自然现象，却无法对其产出真正科学的认识。

病毒学的里程碑事件应属1935年美国科学家Stanley对于烟草花叶病毒的提纯，使人们不再空泛地想象病毒的存在，而是真切地观察和接触到病毒，为今后的研究开辟了广阔的道路。随后，观察手段，培养方法，以及相关的病理性研究手段的不断提升，也使得病毒学这样一门起步较晚的学科开始了飞速发展。

回顾病毒学研究的发展历程，不难发现，学科的发展很大程度上依赖于技术的进步与革新，以及与相关学科的借鉴与学习。故了解和掌握病毒学方法技术的发展历史以及技术要求，对于学科的研究，以及技术的创新，都有诸多裨益。

1 病毒鉴定检测的相关方法技术

对于病毒最直观的认识无疑是其生物学上特征，如病毒的理化性质（如病毒粒子的形态、大小、对理化因子的耐受性、特外存活期等）以及在寄主上的反应（如寄主范围、症状表现、传播方式等）。目前，病毒生物学特征的研究鉴定方法主要分为三大类：显微成像技术（或相关针对病毒形态结构观察的技术）、免疫-血清学检测和分子生物学检测。

1.1 病毒形态结构的观察技术

众所周知，病毒颗粒的大小远小于普通细菌，所以对病毒最直观的鉴定方法就是使用电镜观察，它可以直接地看到病毒的形态结构、存在与否。自第一台电子显微镜的诞生，这门技术已为病毒学在内的多种生物学科作出了重要的贡献，优点也十分明显，操作简便，快捷有效，所以，即使是在进入了分子研究水平的今天，电子显微镜仍然发挥着它不可替代的作用。

另外，在原始的技术基础之上加以改进也形成了一些针对特殊观察对象的电镜技术，如电镜负染技术和免疫电镜检测技术等。低温电镜技术，就是一种结合电镜技术和低温结晶观察病毒的三维结构的技术，其优点不仅在于其分辨率更高，而且对于病毒样品的损伤和失真的概率都大大减小，常用于极微量和高保真要求的病毒观察检测。

X-射线衍射技术是通过扫射病毒微晶得到的衍射图像来分析还原原始的病毒结构，但为了保证衍射图像的准确性，往往对样品的纯度和颗粒完整性要求较高，所以这种技术的使用范围相对受限。

核磁共振技术，相对于前面提到的技术，对于操作的要求更低，运用范围也更广，但是对于结构的准确性判断略低。此技术主要用于病毒短肽的分析以及蛋白小分子构象变化的研究。

1.2 免疫-血清检测方法

此类技术的原理主要根据病毒的侵染性以及其作为白的特性而设计的。运用最为广泛的还是血清学测试，即利用血清中可以和具有某种特定结构特征的病毒结合的抗体，从而进行病毒的定性定量分析。此法也广泛应用用于医学临床的诊断，操作简便，低廉有效。

酶联免疫吸附实验（ELISA）也是利用特异抗体吸附病毒颗粒的原理，只是在抗体上附带了酶标记，从而使反应可以有颜色强弱的变化，利于定时定量监测病毒浓度。此法灵敏度高，且不受浓度范围或其他抑制剂的干扰，也越来越多地应用于相关的生产实践中。

免疫组化技术也是将抗体带上特殊的显色基团，使其游离时不显色，而于抗原物质结合后显色。利用这个特点，可以检测特定组织中不同区域的病毒含量已经分布特点，利于进行组织性毒理分析。

1.3 分子生物学检测方法

病毒寄生在宿主细胞内，但它又有不同于宿主细胞的特异基因组序列，特异序列的存在就说明病毒的存在，这就是分子生物学检测病毒的原理。

聚合酶链式反应（PCR）是其中最为常用的一种检测手段，其原理即利用DNA半保留复制的特点，以原始DNA为模板合成两条一样的双链，从而达到扩增量指数增长，DNA总量可检测的目的。另外，由于病毒的核酸有的是DNA，有的是RNA，所以常规的PCR以及反转录PCR即可针对不同的病毒基因进行检测。

实时定量PCR与传统PCR基本相同，只是在体系中加入荧光基团，反应中利用CCD实时读取荧光信号，检测。不仅减少的污染和浪费，也使定量快速而方便，可以实现多样品和高通量的反应。

核酸原位杂交的原理是利用生物素编辑的cDNA探针来杂交组织中的样本，从而确定病毒在宿主中的分布和载毒量。该技术，往往与免疫组化一起使用。

dsRNA技术是利用dsRNA在一定条件下与纤维素特异结合的性质，从来快速简便的提取检测出病毒颗粒中的dsRNA等，高效准确，在普通实验室和生产工厂中都有所应用。

2 病毒的分离与培养的相关技术方法

2.1 病毒的提纯技术

作为病毒学研究的重要技术前提，病毒的提纯质量往往影响了后续一系列的步骤，所以其重要性不言而喻。由于病毒的生长特性、理化性质和宿主都差异颇大，提纯的方法也不尽一致。

在病毒研究初期，沉淀法最常被使用，其主要利用病毒的蛋白外壳，改变溶剂性质，从而分离病毒粒子。相对而言简便快速，但也常存在粗糙易变性的缺点。

色谱法源于化学中多组分的分离，由于生物成分的多样性，也常使用该技术。色谱法主要分为吸附法、柱层析法和电泳法，都是利用较为温和的环境，以及病毒的特异吸附或凝集等特质而设计的技术。种类繁多，应用广泛。

超速离心利用样品中不同成分拥有不同的沉降系数，在离心过程中，不同成分会在溶剂的特定位置形成区带，从而达到分离提纯的目的。此法常使用生物活性溶剂，且离心本身对病毒粒子损伤较小，故常用于理想的病毒快速分离技术。

2.2 病毒的获取

最初的植物病毒学和动物病毒学的诸多研究都是建立在活的宿主体系上的，并且至今仍在应用，如生产不能体外繁殖的病毒、研究病毒感染的病理作用、检测疫苗的安全性等。但动物宿主体系存在太多弊病，随着细胞培养技术和分子生物学的发展，有逐渐被淘汰的趋势。

现在，病毒的获取主要是三种途径：从宿主直接获取、感染宿主扩增病毒、直接合成，其中后两种途径使用更为广泛。

感染宿主扩增病毒即要使用到组织细胞培养，这项技术本来属于细胞学的范畴，后由于动物源性或者细菌源性的病毒研究需求，此技术也越来越多地应用于病毒学的研究中。如，空斑分析最初用于测定噬菌体含量，而今也逐渐普及为动物病毒的研究中去。

直接合成法则是利用动物转基因技术，将病毒的遗传信息整合进目标动物中，在动物体内完成基因的表达，蛋白的合成，以及病毒的组装等步骤。而动物转基因技术也是现今生物领域的热点内容，技术繁多，更新迅速，也为病毒的研究提供了良好的基础。

3 病毒的功能机制研究的相关技术方法

3.1 病毒的遗传学的研究

关于病毒遗传学的研究和细菌等微生物的遗传学研究技术相似，如PCR等。但是病毒的遗传物质除了可能是DNA还可能是RNA，而且现在对于RNA病毒的研究居多，所以针对性的技术也与细菌等微生物的遗传学研究技术有所区别。

对于RNA病毒使用最多的是反向遗传学技术，最初即使用反转录PCR得到病毒RNA的cDNA，从而完成病毒基因组的探索工作，以达到了解或有目的性改造病毒基因组实现生产应用的目的。此法对于类型多样的病毒研究提供的最为基础的遗传学数据，为疫苗开发筛选、新型病毒载体等多方面都给予有力的技术支持。

针对病毒易变异的特点，单链构想多态性检测技术（SSCP）则理想地解决了这一问题。近年来，对于多种模式生物的基因组测序的发展，越来越多的研究开始着重于探索基因变异的问题，而SSCP技术正是这样发展起来的。其主要用于检测基因点突变和短序列的缺失和插入，为病毒的分子演化规律以及流行病学提供充分的证据。

基因芯片技术的概念来源于计算机芯片，即将大量寡聚核苷酸以阵列形式有序固定于载体表面，与待测样本的病毒分子杂交，然后利用化学发光或同位素等显色方法，用CCD等仪器对杂交信号进行高效检测分析。主要用于病毒基因表达谱和基因多态性等方面的研究。

3.2 病毒表达机制的研究

在病毒的表达机制研究中，主要是利用不同的检测手段，判断病毒表达的具体情况，并对于病毒表达的情况进行总结归纳，研究其时空上的机制和规律。

Northern Blots即针对病毒RNA样品的技术手段，原理与Southern Blots相似，利用探针与固相RNA杂交，再对探针分子的图像进行捕获和分析。此法特异性高，常用于分析已知基因的表达情况。

mRNA表达差异技术主要使用反转录PCR以及等量不同宿主的定量检测，来确定抗病种和感病种的差异表达基因，从而进一步确定造成品种差异的原因。

3.3 病毒蛋白质的研究

病毒蛋白决定了病毒的形态结构，常作为抗原来激发人体内的免疫反应，作用于宿主细胞信号转导途径，导致宿主细胞内信号转导发生紊乱；并且一些病毒蛋白具有酶的作用，可作为细胞毒素作用于宿主细胞。

大范围而言，病毒蛋白质研究的技术，都隶属于蛋白质组学的研究范畴之内，只不过针对不同特性的蛋白，往往会选取最为有效而简便的技术方法进行研究。而由于蛋白质分子结构、化学生物特性等多方面差异很大的特点，其针对性技术也是五花八门，在此仅列举较为常用的技术，以供研究者学习参考。

经典的方法有亲和层析、抗体受体法、抗细胞受体法、抗独特型抗体法、病毒覆盖蛋白法。大多还是利用病毒蛋白和抗体蛋白或者其他蛋白或大分子物质的作用，来检测病毒蛋白的特性。虽然这些方法快速简便，但是由于方法本身较为粗糙，样品用量较大，准确性存疑等问题，现在仅在低要求情况下使用。

现代的方法则更加丰富，也分别具有各自的特点，常被运用于现在的病毒蛋白的研究。

噬菌体表面呈现技术是利用噬菌体本身表达的两种结构蛋白会暴露在噬菌体表面，故将外源基因倒入两个结构蛋白基因间，使外源序列一起表达，然后让表达产物与大量配体结合，筛选特殊结合性配体。但此法表达出来的蛋白可能与天然状态不符，所以使用较为受限。

免疫共沉淀是一种成熟蛋白作用技术，其原理为在溶液或细胞中，用一种蛋白的抗体耦合可与此蛋白特异结合的另一蛋白，从而形成一抗体两蛋白的沉淀，从而获取具有结合饵蛋白能力的未知蛋白，探索细胞中蛋白作用机制。

酵母双杂交技术是利用真核基因的特殊表达机制，通过将两个蛋白的编码序列整合在同一酵母细胞内的特殊转录激活域附近，若两种蛋白可以发生相互作用，则会激活相应的报告基因，从而报告蛋白的相互作用。此法常用于筛选病毒蛋白的特异膜蛋白受体。

除了以上列举的技术之外，还有cDNA文库技术、质谱分析技术、GST Pull-down技术、串联亲和纯化、荧光能量共转移等多种技术应用于蛋白互作的研究。

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病理学的基本研究方法篇（8）

一、以往病例教学存在的问题

病例教学方法早在20世纪90年代就已经开展，但是教师应用起来参差不齐。现在编写的中职及高职教材都强调将知识点活化运用，往往都要求引用病例在教材中，特别是一些职业学校的教材，病例更是占教材内容相当篇幅。但实际教学应用中，教师往往习惯于以往的教学思维，在教学过程中主导应试教学，强化学生掌握常规固定知识点。病例只是部分学生在课后随意阅读的内容，毫无实践应用价值。有时教师也受教学学时限制，无法开展病例教学，更谈不上病例的深入研究。例如，中职病理教学，教材要求学时72学时，72学时中既要完成基础病理学内容，又要完成病理生理学内容，每堂课内容知识点遍布，教师总感觉一直在讲，学生一直在听，但每每下课时都是仓促收尾。更深一步存在的问题，就是现在的中职基础医学教学注重知识点的细化掌握，考试内容固定死板，学生必须掌握教材的条条内容，才能完成考试。这种现状造成的结果，就是教师无法抛开期末考试成绩来开展病例研究。

二、病例研究教学模式实践开展状况

病例教学中，病例是教学的核心，学校倡导基础医学教学以病例研究为主导。病例研究在教学中的开展首先要求病例设置要科学、合理。我校要求基础医学解剖、生理、病理学科建立专业病例库，每节教学内容完全围绕病例研究来开展。建立病例库要求专业教师将知识点梳理后，寻找、选择、设计病例，让知识点潜藏在病例中，让学生通过浅显易懂的临床症状，深入追寻其内在原由根理，从而通过自主探知，培养临床思维能力，完成医学教学目标。病例库的建立激发教师到临床工作中寻找典型病例，将典型病例与教学中常遇到的问题结合，对典型病例进行适当的编撰，并紧扣病例设置问题，对病例灵活应用。教师要根据教学内容和教学目标，将每个知识点用病例串联在一起，在教学过程中选择一个或若干个典型的具体病例，经过精心设计、推敲，引导学生层层深入展开分析研究，既融合知识性，又要有一定趣味性，让学生的兴奋点能紧紧的围绕在学习中，从而让学生学会概括知识要点，便于深刻理解和把握。

病例研究方法在我校实践开展效果显著的原因，除了专业设置课程病例库外，还有一个重要的原因，就是考试内容完全以病例形式设置。学校自2002年成立无纸化考试系统后，无纸化考试覆盖基础医学全部学科。题库最早建立中，病例题比例只占10%～25%，近几年通过病例研究教学后，病例题量已经提高到总题量的80%～90%。教师在开展教学中将病例研究结合到考试应用中，提高学生的学习关注力，也将教师对教学的研究集中到病例的采集、设计、应用中。

三、病例研究教学模式的教学效果

以往的课堂教学活动，多是以教师为中心形成的灌输式教学，枯燥被动的学习，影响了学生的学习热情和主动性。2009年，基础医学等科目期末考试成绩不及格率高达35%。2010年，我校在2010级护理班基础医学教学中的病理科目中开展病例研究教学法，为对比教学效果，应用两种教学方法在同一年级专业学生中开展教学，最后通过学生的卷面得分情况，来探究开展病例研究教学模式在医学基础学科教学中的应用效果。2010级护理10个中专班分成两组，5个班仍是采用传统理论讲授法进行教学，另5个班则教师授课全程以病例研究为主导。病例研究贯穿课堂始终，教师在教学中侧重教授学生研究能力，通过研究病例来理解基础理论知识点。期末考试应用相同试题考试，采用病例教学法的教学班不及格率为11%，而另5个班的不及格率则为32%。通过对比，应用病例研究教学模式来开展基础医学教学能显著提高学生的学习兴趣，进而提高学习成绩。在活跃课堂气氛的同时也能强化知识的应用能力，更能实现培养有创造力的实用型医学人才的目标。通过三年的教学实践开展，病例研究教学模式在中等职业卫生学校医学基础学科中有很高的应用价值。

四、病例研究教学模式可增强教师的综合教学能力

基础医学教学中不断强调的一个重点，就是与临床医学相结合，学生学习基础医学的最终目的是应用到临床实践中，通过掌握的基础医学理论解决临床医疗实践中遇到的复杂问题。病例研究教学模式对开展基础医学教学的教师提出了较高的要求，可以促进教师综合教学能力的提高。教师在开展教学中，不再只局限于传授书本上的规则和理论，而是将各章节的难点和重点，精心设计在病例中，创造出让学生身临其感的教学情境，引导学生进行知识的探索，找到因果关系。我校通过在基础医学教学中应用病例研究教学模式，使基础医学教师不断增加了临床实践愿望。3年来，共有6名教师到本市三甲医院临床实践，在实践中教师通过经历的临床病例，把基础医学理论教学内容进一步巩固、活化，教师的教学技能和业务水平不断提高。

病理学的基本研究方法篇（9）

对于把民族医学的好处融入生物医学中，对结果的研究是重要的第一步。然而，这种对结果的研究从长远观点看也有一种简化论和排队性的问题，他对于亚洲医学体系及其医者们，包括藏医在内是不利的。这里的简化认是指一种步骤，他把医疗理论原则和实践加以忽略，或者简化成在生物医学临床中得以容易实践的简单的技术；而排队性则是指这种替代形式的知识，如埋藏在对解剖学、生理学和治疗学中的藏医学方法，被用盛行的西方或美国框架加以排除或替代了。

我将在六个人种学方面的例子中阐述这些步骤，以阐明对临床疗效研究的复杂性。

1、翻译诊断法的复杂性

①在最早对临床疗效研究的复杂问题之一是如何在生物医学框架中找到与藏医诊断一致的翻译疾病的方法。如我本人在研究藏医妇人疾病时，收集了一般妇人病的资料。在一般的问题中，一种叫“mngal　nad　mkhris　rgyu”的是最普遍的，如果从文字上对译成妇女子宫与胆有关的病症，仅以病名而论，生物医学中并无与此相同的病症，在门诊中，每年要治疗3040个这类病人。另一种常见病是“子宫内肉赘”（sha　skran　phembo），我从资料中看到，也听说藏医对此病疗效很好，在对藏医治疗这些疾病的疗效进行观察研究时，我要向生物医学的医生们请教，以便决定这些病相当于生物医学的何种病。

②在确定临床疗效的努力中一个复杂的问题是在藏医学与生物学中好几种病症，反之亦然。例如：“妇女子宫与胆有关的病症”可相当于生物医学一类疾病，包括盆腔炎、性病、严重霉菌感染、月经不调及子宫内膜炎。就藏医学而言，生物医学诊断为盆腔炎症的可以有不同的诊断，如mngal　nad　mkhris　gyu或mngal　nad　rlung　rgyu等。而在子宫内赘生物（sha　skran　phembo），是否相当于一种特殊的子宫内可认定的新生物则尚不清楚，有别于血液的新生物（trag　skran），后者可以或不能相当于生物医学的一种疾病。就生物医学而言，医学对子宫肿瘤、癌症、囊肿和子宫内膜炎——这些可引致子宫和生殖管道中新生物是否能进行鉴别，也不得而知。

③另一个有关的复杂问题是，当对不同医学体系进行翻译时，在一个系统中称为症状者，在另一系统中可能称为疾病，反之亦然。因此，月经不调在生物医学中是一种疾病，而再加上一些其他症状在藏医学则有可能是一种症候。这与以下事实有关，即藏医学对一种“疾病”的确定，是基于对体内某些模式的失衡，意味着鉴别一种症候群或模式的紊乱，它可对全身产生有症状的影响。反之，生物医学则把注意力集中于把疾病作为一种独立的现象，它可以作为体内一种独立的病症加以处理。这就是为什么人们经常听到说藏医治本，而生物医学则治标（症状）。

病理学的基本研究方法篇（10）

对于把民族医学的好处融入生物医学中，对结果的研究是重要的第一步。然而，这种对结果的研究从长远观点看也有一种简化论和排队性的问题，他对于亚洲医学体系及其医者们，包括藏医在内是不利的。这里的简化认是指一种步骤，他把医疗理论原则和实践加以忽略，或者简化成在生物医学临床中得以容易实践的简单的技术；而排队性则是指这种替代形式的知识，如埋藏在对解剖学、生理学和治疗学中的藏医学方法，被用盛行的西方或美国框架加以排除或替代了。

我将在六个人种学方面的例子中阐述这些步骤，以阐明对临床疗效研究的复杂性。

1、翻译诊断法的复杂性

①在最早对临床疗效研究的复杂问题之一是如何在生物医学框架中找到与藏医诊断一致的翻译疾病的方法。如我本人在研究藏医妇人疾病时，收集了一般妇人病的资料。在一般的问题中，一种叫“mngal　nad　mkhris　rgyu”的是最普遍的，如果从文字上对译成妇女子宫与胆有关的病症，仅以病名而论，生物医学中并无与此相同的病症，在门诊中，每年要治疗3040个这类病人。另一种常见病是“子宫内肉赘”（sha　skran　phembo），我从资料中看到，也听说藏医对此病疗效很好，在对藏医治疗这些疾病的疗效进行观察研究时，我要向生物医学的医生们请教，以便决定这些病相当于生物医学的何种病。

②在确定临床疗效的努力中一个复杂的问题是在藏医学与生物学中好几种病症，反之亦然。例如：“妇女子宫与胆有关的病症”可相当于生物医学一类疾病，包括盆腔炎、性病、严重霉菌感染、月经不调及子宫内膜炎。就藏医学而言，生物医学诊断为盆腔炎症的可以有不同的诊断，如mngal　nad　mkhris　gyu或mngal　nad　rlung　rgyu等。而在子宫内赘生物（sha　skran　phembo），是否相当于一种特殊的子宫内可认定的新生物则尚不清楚，有别于血液的新生物（trag　skran），后者可以或不能相当于生物医学的一种疾病。就生物医学而言，西藏医学对子宫肿瘤、癌症、囊肿和子宫内膜炎——这些可引致子宫和生殖管道中新生物是否能进行鉴别，也不得而知。

③另一个有关的复杂问题是，当对不同医学体系进行翻译时，在一个系统中称为症状者，在另一系统中可能称为疾病，反之亦然。因此，月经不调在生物医学中是一种疾病，而再加上一些其他症状在藏医学则有可能是一种症候。这与以下事实有关，即藏医学对一种“疾病”的确定，是基于对体内某些模式的失衡，意味着鉴别一种症候群或模式的紊乱，它可对全身产生有症状的影响。反之，生物医学则把注意力集中于把疾病作为一种独立的现象，它可以作为体内一种独立的病症加以处理。这就是为什么人们经常听到说藏医治本，而生物医学则治标（症状）。

病理学的基本研究方法篇（11）

            中医学自身的学科特点决定了在今后相当长的时期内，学术继承和发扬是学科建设的主要任务。中医学包括中医儿科学的大量学术积累，其中蕴藏着大量的真知灼见，任何学科的发展都离不开对已有学术成果的传承，因此，我们要发展中医儿科，就必须最大限度地弘扬本学科学术精华，特别是在中医儿科临床上，充分发挥本学科有特色、优势的治法、病种，扩大学科服务范围，继而谋求加快学科学术发展的速度，这是本学科学术进步和事业发展的中心任务。

1  发挥学科特色优势是面向临床的主要任务

在目前中医、中西医结合、西医儿科并存的格局下，医疗市场行业竞争激烈。中国和世界各国中医儿科的临床工作发展很不平衡，一些单位的中医儿科迅速发展，也有一些单位的工作在萎缩。凡是工作开展好的单位，共同的经验都是发挥了中医药的特色和优势。因此，能否发挥好中医儿科的学科特色和优势，就成了我们事业成败的关键。

   

关于中医儿科的特色优势病种，我们在2007年曾组织了中国城乡不同地区、不同等级医院、不同职称级别、中医中西医不同专业儿科工作者的抽样问卷调查。调查结果显示，与西医相比，大多认为中医儿科（某些情况下的中西医结合）在下列病种（证）或其某个阶段具有治疗优势。(1)新生儿疾病：胎怯（早产儿和足月小样儿）、新生儿黄疸、新生儿硬肿症、新生儿腹泻、新生儿脐部疾患等。(2)呼吸系统疾病：急性上呼吸道感染、急慢性支气管炎、毛细支气管炎、病毒性肺炎与其他类型肺炎、反复呼吸道感染等。(3)消化系统疾病：鹅口疮、口炎、胃食管返流及反流性食管炎、胃炎、消化性溃疡、厌食、小儿腹泻等。(4)营养性疾病：消化不良、营养障碍、营养性贫血等。(5)循环系统疾病：病毒性心肌炎等。(6)泌尿系统疾病：急性肾小球肾炎、肾病综合征、血尿、泌尿道感染、遗尿症等。(7)神经肌肉系统疾病：小儿癫痫、脑性瘫痪、惊厥等。(8)心理行为障碍性疾病：多发性抽搐症、注意力缺陷多动障碍等。(9)内分泌疾病：性早熟。(10)免疫、变态反应、结缔组织病：支气管哮喘、过敏性鼻炎、过敏性紫癜、湿疹、皮肤黏膜淋巴结综合征，幼年类风湿病等。(11)感染性疾病：麻疹、风疹、幼儿急疹、水痘、手足口病、流行性腮腺炎、流行性感冒、传染性单核细胞增多症、流行性乙型脑炎等病毒性脑炎、百日咳、急性感染性多神经根炎等。同时，中医特色疗法，如推拿疗法、针灸疗法、中药外治疗法等，在儿科疾病治疗中有着广泛的应用和良好的效果。

   

从以上中医儿科特色优势病种来看，涵盖了儿科临床常见的多数疾病。中医儿科不仅在许多儿科慢性病中具有整体调节、扶正祛邪的特色，而且在急性疾病，特别是感染性疾病治疗中有很大优势。中医儿科临床优势突出表现在以下几方面。

   

一是急性病毒感染性疾病。据世界卫生组织（whc）的统计资料显示，近年来，在儿科急性感染性疾病中，细菌感染性疾病呈下降趋势，病毒感染性疾病呈上升趋势。我国近年小儿呼吸系统感染性疾病临床研究资料表明，小儿急性上呼吸道感染90 %以上为病毒感染，急性支气管炎75 %为病毒感染，肺炎中约50 %为病毒感染。近几年造成广泛关注的公共卫生问题，如传染性非典型肺炎、禽流感、手足口病、甲型流感h1n1等，都属于病毒感染性疾病。已经有许多的临床研究资料证实，中医药治疗多种病毒感染性疾病较西药治疗更加有效、安全。例如：我们承担的“十五”国家科技攻关课题“小儿肺炎中医证治规律研究”经过四中心、360例、随机、盲法、对照临床研究，清肺口服液试验组痊愈显效率89.62 ％，利巴韦林对照组痊愈显效率73.92 ％，试验组疗效显著优于对照组(p＜0.0001)。我们承担的另一项“十五”国家科技攻关课题“中医药治疗病毒性肺炎疗效评价方法研究”结果，清开灵注射液联合儿童清肺口服液的中药治疗方案，与利巴韦林注射液联合复方愈创木酚磺酸钾口服液的西药治疗方案相比，不仅中药组的终点(10 d)疾病疗效评价优于西药组，而且多数评价指标（咳嗽、痰壅、发热、恶寒、紫绀、面色、口渴、食欲食量、舌象、脉率）中药组的起效时间早于西药组。

   

二是脾系疾病。脾系疾病是儿科临床发病率仅次于肺系疾病的常见疾病。脾系疾病包括消化道疾病和营养性疾病。中医药治疗消化道疾病如泄泻、积滞、厌食、功能性腹痛等，在调整消化道功能方面有着不可替代的优势。因矿物元素、维生素等营养物质缺乏所致疾病，如锌缺乏症、营养性缺铁性贫血、维生素d缺乏性佝偻病、疳证等，不仅不少中药中含有一定量的矿物元素和维生素等营养成分，增加了摄入量，更重要的是中药的调脾助运等作用，促进了机体对各种营养物质的吸收和利用，降低了不良反应。一批行之有效的中医临床诊疗操作技术在不断扩大应用，如推拿治疗小儿泄泻、便秘、腹痛，董氏指压手法治疗婴儿吐乳症技术等，这些简便有效诊疗技术的临床推广，扩大了中医特色疗法在中国城市社区、新型农村合作医疗及世界各国的普遍应用。

   

其他如中医药调补先后天治疗新生儿疾病，调整阴阳治疗小儿心理行为障碍性疾病，中西医结合治疗小儿肾脏病，发时治标、平时治本观点在慢性复发性疾病中的应用等，都是发扬儿科中医药治疗优势的例证。

   

中医儿科优势病种及特色疗法的临床应用，满足了现代社会对于儿童预防保健的需求，适应了现代临床疾病谱的变化，顺应了现代人对于医疗安全性的重视，减少了抗生素、激素等化学药物的滥用，在各国医疗保健事业中发挥了越来越大的作用。

2  加速学科学术发展是面向未来的主要任务

   

在历史跨入21世纪之时，我们总结过去，展望未来，还应当清醒地看到虽然中医儿科学的现展速度已经超过了历史上任何一个时期，但是，与西医儿科学和其他自然科学学科的发展速度相比，则显得相对滞后。我们必须加快学科学术发展速度，这才是面向未来、能够获得本学科可持续发展的正确选择。

   

任何一门学科的学术发展都需要依靠科学研究，中医儿科学的未来发展也必须依靠本学科科学研究的开展。中医儿科学科研的领域需要不断扩大、科研水平需要不断提高，才能推动学科的快速发展。

   

建立规范是学科学术发展的基础。所谓规范，库恩《科学革命结构》说：“她包括了一门学科的研究方法、总体框架以及最基本的概念、理论和定律。”由于历史的原因，中医儿科学在规范化、标准化方面所做的工作还很不够。中医儿科学科需要建立的规范，必须是能符合本学科学术特点和规范化要求的各种规范。例如：切合中医药学本义的中医儿科学名词术语规范，有中医药特色的诊断辨证标准，能反映中医药优势又能得到学术界公认的疗效评价标准，符合循证医学原则的临床研究规范，利于中成药开发又符合新药研究原则的制剂工艺和质量标准等。这些规范的产生，要通过科学研究来实现。在临床研究和数理统计分析基础上形成规范，是最佳的研究方法。但是，临床研究成本高、耗时费力。近年来，在儿科规范化工作中已普遍采用了文献研究、专家问卷调查等研究方法，特别是基于德尔菲法的专家问卷调查统计分析的方法，能集中本学科权威专家的意见，是一种在国际上被广泛采用的研究方法，在《儿科常见病中医诊疗指南》的研究中已经取得良好的效果，今后将会在中医儿科学规范化、标准化工作中有越来越广泛的应用。作为世界中医药学会联合会的重要任务之一，要求“制定并与中医药有关的国际行业标准”，我们儿科专业委员会今后在这方面将承担起与儿科有关的任务。

   

中医儿科学基础研究范围广泛。整体观点是中医学优势之一，要将儿童的孕育成长、保健预防、病因病机等，放到各个国家、各个民族不同的天时、地理、环境的大自然整体和脏腑经络、气血津液的内环境整体中加以认识。对中医儿科基本理论中的若干问题不要再过多地进行理论论争，要重视通过科研来认识其科学内涵，辨析正误，吸收其合理的部分用于指导临床。辨证学研究的重点是辨证客观化，即如何将通过现代检测方法获得的疾病微观信息纳入中医儿科学辨证体系以及如何将各种诊查方法所采集到的“证象”定性定量，从而形成客观的证候诊断标准。治疗学研究的重点，一是儿科常用治法的疗效机理研究，二是儿科药物剂型改革及多种疗法研究，三是有毒中药的毒理及减毒方法研究，四是各种治法的优化组合及其适应病证研究。要研究出更多疗效可靠、应用方便，适应当今和未来社会需要的儿科疗法和药剂。

   

临床研究的范围目前仍将侧重那些中医药有优势、儿科临床常见的病种。例如流行性感冒、病毒性肺炎、手足口病等病毒性疾病，哮喘、过敏性紫癜、肾病综合征等免疫性疾病，腹泻、营养素缺乏症、肥胖症等脾胃病，多发性抽动症、癫痫、脑性瘫痪等神经精神疾病，高热、惊风、血症等急症，低出生体质量儿、新生儿黄疸、新生儿硬肿症等新生儿疾病等。同时，在有条件的单位，要面向世界需求，开展中医药治疗儿科现代重点疾病的研究，如儿童艾滋病、各种新型流感等，争取在其中一些疾病取得突破。临床研究的重点在提高中医药临床疗效。要遵循现代流行病学、循证医学和临床科研方法，进行多中心协作攻关，力争探索出一些新的证治规律，研制出一批疗效更好、副作用小而使用更为方便快捷的新药，研究提出中医药治疗的有效、安全、经济的优化治疗方案并加以推广。临床研究的内容将深化，如从笼统的一方治一病发展为辨证立方、异病同治；对难治性疾病或其中某一证型、某一严重合并症等研制有针对性的方药；研究有效方药的剂型改革；研究有效方药的主要有效成分、有效单体并形成体现辨证论治特色的“创新中药”等。

   

实验研究将会更多地直接引入现代科学技术方法，为提升中医儿科诊疗水平服务。要装备先进的仪器设备，逐步研制出儿科常见病的病证结合动物模型，应用各种先进的研究方法，尤其是细胞、分子、基因、蛋白的研究方法，从宏观到微观的各个层次，揭示儿科有效中药及其他疗法的作用机理，为创新疗法、创新理论的建立奠定基础。

   

总之，中医儿科学科学研究的重点在临床，目的在于围绕临床疗效的提高，目标是学科创新性理论的产生，为中医儿科学事业发展，并最终实现学科现代化积累条件。

   

中医儿科学发展的关键在于人才。20世纪下半叶，中医儿科多层次、多形式人才培养的格局已经形成。今后，要根据学科发展需要，改进教学方法，更新教学内容，改善知识结构，提高动手能力，培养更多的中医儿科专业人才。首先是为数众多的临床人才拓展中医儿科服务范围，直接为各国儿童的健康事业服务。同时，必须通过研究生教育和继续教育，造就一批具有宽广深厚的中医理论基础、掌握相关现代科学知识和前沿技术、科研能力强的智能结构型人才，通过他们的创造性思维和捕捉学科学术发展热点问题的能力，经过规范、先进、严谨的科学研究，创造出高水平的科研成果，承担起推进中医儿科学科发展的重任。

   

在学科人才比较集中的单位和地区，要组织起一批实力强大的研究团队，团结合作，才能发挥集体的智慧和力量，在不同的研究领域取得突破。研究方向的确定，应以儿科临床常见疾病、中医药有优势的疾病、学科基础较好为原则，逐渐形成在中医儿科学科专业划分基础上的肺系疾病研究、脾系疾病研究、心肝疾病研究、肾系疾病研究、传染病研究、新生儿疾病研究等研究团队，扩大一批重点学科、重点专科、重点研究室、重点实验室等，不断提高研究水平，产生有创新意义的研究成果。

中医儿科学发展的战略目标是现代化。中医儿科学现代化，必须是对现有水平的超越，产生在传统中医儿科学基础上的质的飞跃，形成与现代自然科学、社会科学融会贯通，同步协调发展的新格局。中医儿科学现代化的实现绝不可能是一蹴而就的，需要通过各个领域、各种方法大量的研究积累，多少代人的长期努力，才能逐步达到。实现这一战略目标，必须以人才培养为基础、科学研究为动力，继承传统为先导、思维创新为途径，加速引进和应用现代科学技术，加快学科学术进步的步伐。可以相信，经过持之以恒的长期努力，中医儿科学的现代化，将会随着整个中医学的现代化而逐步实现。

   

中医儿科学发展至今，成绩斐然；中医儿科学发展前景远大光明。我们这一代中医儿科人，承前启后，肩负着历史的责任，任重道远。相信经过我们的不懈追求，中医儿科事业一定会以更快的速度向前发展。

predominance and characteristics of pediatrics of chinese medicine and its development strategy

wang shouchuan

(institute of pediatrics of chinese medicine, nanjing university of  traditional chinese medicine, 210029, nanjing, china)