科研课题研究的意义大全11篇

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[中图分类号] G642.41 [文献标识码] C [文章编号] 1673-7210（2013）07（b）-0136-03

概念图是以绘图形式描述知识概念的一种教学方法，是国际上流行的发展学生自主性学习、主动学习、个性化学习的教学策略和方法[1-3]。概念图法在数学、物理等教学领域已广为应用，近年来已尝试应用于护理、临床医学的教学，并取得良好效果[3-4]。但概念图教学法在医学研究生课题选题教学中的应用罕见报道。我们以干细胞在心血管领域的基础研究为例，展示概念图在研究生科研选题中的应用，介绍如下：

1 概念图理念与科研选题

概念图是20世纪60年代美国心理学家Novak提出的一种用来组织和表征知识的工具，是将某一主题不同级别的概念置于方框或圆圈中，再以各种连线将相关概念进行连接，形成直观形象地关于该主题的空间网络结构，故而称之为概念图。概念图是学习者通过组织和分析信息，确定关键概念，将其图形化地排列并进行有意义的连接，因此是一种有目的的自我调整判断和不断进行归纳演绎推理的过程，有助于自主学习和意义建构，且有助于培养评判性思维、创新思维能力，以及解决问题的能力[2]。

科学研究总是从科学问题开始的，科学问题贯穿于科研工作的全过程。科研选题就是选择、确定和形成所要研究和解决的具体“科学问题”（即课题和内容）。科研选题是整个科研工作带有方向性的关键决策，需要有创造性的想象力。在浩瀚的医学研究领域，如何确定自己的科学问题，的确有一定的难度，根据科研选题的创新性、科学性、可行性原则，从诸问题中遴选出来科学问题，不仅要符合科学进步的发展要求，还要结合自身的科研条件和兴趣等多种因素，通常需要经过大量的比较、分析和论证，而在这一过程中概念图法的理念可以帮助我们更好地理清思路，有助于科学研究的选题。

2 概念图在科研选题中的应用举例

科研课题在立题前都要经历这样的过程：在相关领域进行文献调研或实地考察，提出选题，论证和确定课题。在知识准备阶段，首先要指导学生了解概念图的相关知识，教会学生如何应用Mind Manager软件制作概念图，如何用来建构知识网络结构。以下以干细胞科研选题为例展示如何将概念图理念运用于科研选题的全过程。

2.1 概念图在文献调研中的应用

选题调研的信息源主要来自于文献、国际互联网和具体的专业工作实践等。文献调研是选题的准备阶段。研究生需根据自身专业的需要和知识背景，确定自己的研究方向；然后明确自己的研究领域、研究范围及研究层次；再对国内外在同一领域的情况进行全面的调查研究，跟踪相关发展和应用状况、最迫切需要解决的问题、存在问题、关键难题、发展瓶颈等，足够的知识储备和信息储备决定着科技问题的内涵深度和解答的途径。在广泛浏览资料过程中，对资料内容进行分类、组合，从中寻找问题、发现问题，对比分析后提出问题。医学题目要经过一个酝酿、思考，甚至可能是相当长的构思过程，才能形成初始意念，提出科学问题。

如图1所示，研究生在导师的指导下，通过对有关干细胞基础知识的学习，以及干细胞在心血管领域文献资料的搜集和阅读，掌握国内外研究现状、最新进展和存在的问题，从中发现问题、提出问题，为进一步创新奠定基础。据文献调研结果看，目前在心血管领域，研究较多、较成熟的是不同组织来源的间充质干细胞，而主要应用是心肌梗死，这也是与缺血性心脏病在世界范围内广泛流行相一致的，而在瓣膜病或高血压的研究仅处于起步阶段[5]。如图2所示胚胎外组织来源的间充质干细胞是非常有潜力的种子细胞，开发易于得到、安全、有效的种子细胞，以及改善移植细胞存活率的研究是干细胞移植治疗缺血性心脏病的瓶颈，是研究的热点[6]。而干细胞治疗缺血性心脏病的机制方面也有许多不清楚的地方[7]，如图3所示，机制探讨是基础研究的重要部分，目前对干细胞旁分泌机制和内源性修复机制的研究也是重点和热点。

2.2 概念图在科研立题依据中的作用

在文献调研的基础上提出问题，但要将这种初始意念系统化、深刻化、完善化、变成系统的理论认识，形成科学的假说，是科研立题的过程。在这一过程中，首先要证实假说的科学成分，即是否以一定科学实践和事实根据提出来的，或者是已有文献记载同种问题作为类比，还要通过查阅文献寻找恰当的手段证实这种假说，然后设计出科研工作方案。科研立题中思路清晰很重要，要有条理地将自己的科学假设演绎出来，此时大篇幅的文字叙述会把不太了解这一领域的专家搞糊涂，真正的立题依据是被认可，首先自己要头脑清晰，要让不懂行的人觉得写得有道理，懂行的人觉得写得有深度，而做到这一点有时可借助于概念图的优势。图4为间充质干细胞释放的膜微粒可能是其改善缺血性心脏病心功能的重要介质的机制假想，可以作为立题依据的重要部分，这一概念图简明扼要地将大部分移植入缺血心肌死亡的间充质干细胞在改善缺血心功能的可能机制做了大胆猜想[8]，当然，这一假设是建立在充分的前期研究及文献调研的基础上的，是科学性的假想，而不是空想。

研究创新性本身取决于课题的选题，自选课题过程中，可在学科交叉地带寻找未被人开垦的“处女地”。而对有过工作经历的研究生来说，选择实际工作中遇到过的问题作为科研课题，不论在理论上还是在技术上，都具有较大的优势。对于别人做过的同一课题，如果能从新的角度加以诠释，也不妨为一种创新，称之为思路创新。

2.3 概念图在课题论证及立题中的作用

课题论证是为了确保课题选择正确而对课题及其方案做出论证和全面评审，是根据选题的基本原则，对课题的依据、实施条件、社会与经济效益及对科技发展的潜在价值依次逐项剖析、审议。而科研选题和课题决策是一个不断反馈并反复调整的过程，常常需要反复调研、调整、更改和多次论证。研究生要做的工作就是要将课题的创新性和可行性表述清楚，有充分的依据让专家很快了解课题研究的重要意义。创新性是科研工作的灵魂，创新可以是概念和理论上的创新，也可以是方法上的创新，还可以是应用上的创新。可行性主观方面，包括科研结构和研究人员的素质；而在客观上，要充分考虑科研经费、实验设备、试验材料、时间期限和外部环境等因素。清晰的分析和表述是取得专家认可的重要方式，其中课题的具体方法实施部分因涉及内容较多，不妨可以借助于概念图来清晰描述，这样有助于专家在冗长的文字中快速找到重点。

图5举例间充质干细胞鉴定的实验路径，分别在细胞大体、表型、自我更新、分化功能等多水平、多角度进行验证。更为复杂的实验设计用概念图法表述则更为适宜，研究生可在具体实施中巧加利用，以得到事半功倍的效果。

3 小结

概念图作为一种教学工具，能够构造一个清晰的知识网络，以层次的形式让概念之间的关系条理化和直接化；制作概念图的过程是一种积极的思考过程，它可以将零散的、不关联的思维整理起来，有助于培养学生独立思考、分析和解决问题的能力[9]，特别是有助于培养学生的创新思维能力[9-10]。课题研究阶段是培养研究生创新性必不可少的重要组成部分，将概念图理念引入研究生科研课题选题的过程中，有利于将科研思路条理化、流程化，有利于培养学生整体科研思维能力，而且也可拓展至其他科研课题的申请，是个实用性实践工具。

[参考文献]

[1] Daley B，Shaw C，Balistrieri T，et al. Concept maps：A strategy to teach and evaluate critical thinking [J]. J Nurs Educ，1999，38：1-6.

[2] Novak JD. The promise of new ideas and new technology for improving teaching and learning [J]. Cell Biol Educ，2003，2（2）：122-132.

[3] Torre DM，Daley B，Stark-Schweitzer T，et al. A qualitative evaluation of medical student learning with concept maps [J]. Med Teach，2007， 29（9）：949-955.

[4] Harpaz I，Balik C，Ehrenfeld M. Concept mapping： An educational strategy for advanced nursing education [J]. Nurs Forum，2004，39：27-30，36.

[5] Anversa P，Kajstura J，Rota M，et al. Regenerating new heart with stem cells [J]. J Clin Invest，2013，123（1）：62-70.

[6] Passier R，van Laake LW，Mummery CL. Stem-cell-based therapy and lessons from the heart [J]. Nature，2008，453（7193）：322.

[7] 边素艳，盖鲁粤，郭子宽.骨髓间充质干细胞移植治疗缺血性心脏病的机制[J].组织工程与重建外科，2007，3（6）：350-352.

[8] 边素艳，崔华.膜微粒：干细胞组织修复的新机制？[J].生理科学进展，2012，43（2）：96-100.

篇（2）

 

关键词：小壳体；铸件毛料；加工余量

中图分类号：03 文献标识码：a

1 引言

对于一些小壳体零件，由于铸造毛料，结构复杂，在以往，合格率低至30%左右，零件的设计要求很难得以保证，高投入低产出的日子持续了很长时间，为彻底解决这一瓶颈问题，能提高产品合格率，减少废品损失，完成现场的生产任务，我们对该系列零件的加工进行了工艺攻关研究。

 

2 零件的设计要求及加工难点

小壳体是油门杆操纵机构中的零件，内配滑轮，和钢索联合起传动作用。该零件结构复杂，毛料为ct7级精度熔模铸件，零件上多处需机械加工，部位间相互均有位置要求，加工时装夹困难，毛料与机加之间的同轴问题矛盾突出，因此零件上各部分同时保证装配位置，这对零件加工提高了难度。

 

加工难点：

如毛料图所示，图上2-ф17圆柱位置即要求加工出m14外螺纹，设计考虑到零件结构复杂，零件背面有一个内圆球状形面相连，四方与圆柱面相接，后空刀槽不必机加，m14螺纹机加出即可，直接铸造到位，但在m14圆柱内部要求钻、扩、铰通孔，这一步机械加工与原始铸造圆心造成客观偏移，使退刀槽部分最终壁厚偏薄，这一项目难以满足设计要求，也是小壳体零件中易超差部位，难点所在。

 

3 零件超差的原因分析

由于零件结构复杂特殊，铸件毛料在成形后热处理释放应力过程中变形机率极大，随之自然变形，其中两项变形为主要影响因素。

毛料图如下：

其一是首道工序基准b面与ф14圆柱面不垂直，定位面不准确，直接导致加工从开始就脱离原始中心线，其后的多道工序再传递加积累定位误差，致使最后一个工序机加中心与毛料原始中心越偏越远，而机械加工m14同时在原中心钻通孔，在没有余量的ф12小圆柱段的壁厚差最为明显，薄处超出极限者因此而报废。同时定位不准的毛料，划线检查余量的结果也不可靠，垂直度需限制大0.3mm以内。

 

其二的变形情况是如图所示，毛料螺纹圆柱中心直接变形偏离原始中心线，这类毛料由于退刀槽外无余量，中心偏离超过0.5mm以上者就没有挽救的希望了。

另外，原机械加工的方法为直接领料按工艺规程加工，而由于零件结构复杂，前几个工序加工中并不能反映出最后工序（加工螺纹柱和内孔工序）的可能结果，而偏偏这最后工序还必须得其它部位加工完才得到定位面，才可实施加工。这样，前面的大部分工序一切正常，以至最后的半成品就不得不半途成废品，因为带有机加表面的半成品不能再进行毛料校正了，因而失去了挽救的机会，这个结果让人感到婉惜，无奈，大家决心一定要把废品率降下来。

 

3 针对影响因素而采取的改进措施增加加工余量经与设计协调，允许将非加工表面的退刀槽加一些余量，然后机械加工，因为形状复杂，是方形与圆柱形相接，所以要求加工余量限制在1至1.5mm左右才可。这样才能 挽救偏移不超过1mm的零件。

 

增加提前划线工序

根据该零件的具体情况，力求降低废品率，采取提前预防措施，我厂和铸造厂共同商定，毛料在出厂前在铸造厂先按我机加厂要求划线筛选，觉得有把握的毛料发出来，由于毛料厂划线条件有限，我们机械加工工节中也增加划线检查余量的工序，现采用领料后逐个毛料划线法，首先检查定位面，垂直度限制在0.35以内，超范围的毛料返修至定位面符合要求。然后再次回来划线检查中心偏移量，在单面1mm以内者留下加工。中心偏移量大于1mm的毛料在机加前再退回毛料厂，给他校正机会，予以挽救，尽可能的降低超差机率。

 

调整机械加工工艺尺寸

在加工第二道工序时，针对划线时发现的圆柱中心偏离方向统一性，在公差范围内调整两个避免公差积累的工艺尺寸，将4±0.15调整为3.85～4，将7±0.61调整为7.3～7.61，就避免了安装误差和毛料变形对零件尺寸的影响，因此零件的各项要求均可以得到有效保证。

 

调整后的尺寸如下：

应用措施后取得的成果

接下来的8个月左右 ，我厂先后领取了5个批次的小壳体毛料，虽然件号不都相同，但结构相同，我们均采用了上述方法，并作了细致的跟产记录，并制表如下：

以上五批毛料加工的平均合格率为88.3%。

结语

通过以上113件毛料的加工跟产记录看出，改进后的合格率由原30%提高到88.3%，该零件在加工中产生的壁厚不均问题得到了有效控制，说明此工艺方法是行之有效的。

 

参考文献

篇（3）

这道题的答案是：轨迹方程为x281+y236=1（x≠0），轨迹是一个椭圆（除短轴端点外）.

我把这道题当做作业布置给学生，学生只是满足于把题目解答出来，而且绝大多数学生都能正确解答本题.但是，在学了椭圆和双曲线之后的一节习题课中，我要求学生研究这道题.下面是这一道课本习题的教学实录.

师：今天这节课，老师想请同学们研究一道课本题（P96练习4）.

开始，许多学生都认真研究他们的解答，看看是否做错，很快他们发现他们没有做错，他们说：“老师，我们没有做错，你要我们研究什么？”

师：是的，这道题你们是没有做错，但老师就是要你们研究这道题.

经过热烈的讨论，有学生说：“老师，我想看看它的逆命题是否正确？”

师：很好，大家不妨以这位同学的想法为例做一些研究.

很快有学生写出了它的逆命题：

已知椭圆方程为x281+y236=1（x≠0），短轴的两个端点为B、C，若点A是椭圆上任意一点（异于B、C），求点A与B、点A与C的连线的斜率的积.

经过计算得到答案正好是-49.

这时一些学生脸上露出成功的喜悦，并感叹：“原来这个命题的逆命题也成立！”

师：很好，同学们经过研究，发现了这个命题及它的逆命题都是正确的，但这仅仅是研究的开始，请同学们继续研究.

于是，学生再次进入思维、探索的，所有学生都在进行积极的探索.有的学生想研究它的否命题、逆否命题，但很快发现研究这四种命题的关系没有什么价值；有的学生研究椭圆的方程x281+y236=1（x≠0）中的数值与-49的关系；有的学生写出了P96练习4的一般形式：ABC一边的两顶点B（0，m）、C（0，-m），另两边的斜率之积是常数-p，求顶点A的轨迹；还有的学生得出了更一般的命题：与两定点的连线的斜率之积是定值的点的轨迹是椭圆……

教师在教室巡视，不时给学生一些提示和点拨，经过学生的研究和讨论，得到了如下命题：

平面内的一个动点M（x，y）到两定点A1（-a，0），A2（a，0）的斜率之积等于常数e2-1（-1

此时，同学们十分高兴，个个脸上都露出了成功的喜悦.

师：你们真了不起，通过研究你们发现了这样漂亮的命题，真是太棒了.但是，谁能使这个命题更加完美呢？

学生再一次进入思维、探索的.有的学生想到了教材P108习题1：ABC一边的两个端点是B（0，6）、C（0，-6），另两边的斜率的积是49，求顶点A的轨迹.[答案：双曲线x281+y236=1（x≠0）]；有些学生则直接对命题中的常数的取值范围进行研究，他们觉得这个常数的改变会引起曲线的形状的改变……（下课铃响了.）

师：同学们，这节课你们通过对一道课本题的研究，发现了一个重要的命题：平面内的一个动点M（x，y）到两定点A1（-a，0），A2（a，0）的斜率之积等于常数e2-1（-1

篇（4）

目的改进黄连消渴颗粒的提取工艺。方法分别以盐酸小檗碱和多糖的含量为指标，采用正交设计法和单因素比较法，设计优选了黄连消渴颗粒剂的提取工艺。结果优选出的提取工艺为：黄连与原方中其余四味药分开提取；黄连粗粉浸泡30 min后，用12，10倍量水提取2次，提取时间均为1.5 h；其余4味药一起提取，浸泡30 min，加10倍量水提取1次，提取时间为1.5 h。 结论该实验确定的提取工艺方法合理，稳定可行。

【关键词】 盐酸小檗碱 多糖 提取工艺

Abstract：ObjectiveTo improve the extraction technology of Huang-lian-xiao-ke Granule. MethodsThe extraction technology for Huang-lian-xiao-ke Granule was optimized through single comparative and orthogonal law with the use of the extraction rate of berberine hydrochloride and polysaccharide as the assessment index. ResultsThe optimized extraction technology for Huang-lian-xiao-ke Granule was as follows: Copis chinensis Franch. and the other four kinds of raw materials in the origin prescription were decocted separately; after soaked for 30min， the coarse powder of Copis chinensis Franch was decocted with 12，10 times water each time and both for 1.5h; after soaked for 30min， the four kinds of raw materials were decocted together for 1.5h just one time with 10 times water. ConclusionThe extraction technology is reasonable， stable and easy to operate.

Key words：Berberine hydrochloride； Polysaccharide； Extraction technology

黄连消渴颗粒是本课题组在研的一个六类中药新药，由黄连、黄芪、山药等5味药组成，具有清热润燥、益气养阴、生津止渴等功效，临床上主要用于治疗消渴(2型糖尿病)［1］。为了充分提取有效成分，提高疗效，同时也为制成固体制剂提供实验依据，本文对其提取工艺进行了研究。因方中降血糖的主要成分为盐酸小檗碱和多糖，根据其性质及该方的临床应用，故初步确定君药黄连与其余4味药分开提取，均用水提。

1 仪器与材料

以上5味药材均购于四川峨眉仙山中药科技发展有限公司。黄连Copis chinensis Franch.为川产味连，黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus (Bge.) Hsiao为蒙古黄芪，山药Dioscorea opposita Thunb.为怀山药，其他药材均为主产地优质药材，经西南交通大学中药研究所鉴定均为正品。无水葡萄糖对照品由中国药品生物制品检验所提供，批号：110833-200302；盐酸小檗碱对照品由中国药品生物制品检验所提供，批号：110713-200208；乙腈、乙醇、磷酸二氢钾均为色谱纯，浓硫酸、苯酚为分析纯；岛津UV300紫外分光光度计；岛津LC-20AT高效液相色谱仪。

2 方法与结果

2.1 黄连提取工艺的考察

2.1.1 正交实验设计 根据预试结果，以提取时间、料液比、提取次数为3因素，每个因素3个水平，进行L9（34）正交实验。因素水平设计表见表1。

2.1.2 正交实验方法与结果称取9份黄连粗粉，每份12 g，按照表1所列因素和水平，加水浸泡30 min后回流提取，趁热抽滤，将提取液定容至500 ml。精密量取以上提取液2 ml，用无水乙醇定容至10 ml。离心，取上清液1 ml，再用无水乙醇定容至10 ml，用0.45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。按照“2.1.3”项下方法测定盐酸小檗碱的含量。结果见表2。

表1 因素水平表（略）

表2 正交实验结果（略）

由正交实验结果可知，影响提取效果的因素顺序为：C（提取次数）＞A（提取时间）＞B（料液比）。极差结果为A3＞A2＞A1，B3＞B2＞B1，C3＞C2＞C1，直观分析确定最佳提取工艺为：A3B3C3。鉴于提取次数（C）的拐点在C2，考虑实际生产成本，可将提取时间（C）由3次调整为2次。综合考虑，将工艺优化为A3B3C2，即：黄连粗粉浸泡30 min后，用12，10倍量水提取2次，提取时间分别为1.5 h。

2.1.3 盐酸小檗碱的含量测定色谱条件：色谱柱为Waters Symmetry ShieldTM RP18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.033 mol/L磷酸二氢钾溶液（30∶70）；流速0.8 ml/min；检测波长345 nm；柱温25℃；进样量10 μl。

对照品溶液的制备及标准曲线的绘制：精密称取盐酸小檗碱对照品5.0 mg，置10 ml容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取1 ml，置10 ml容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，配成50 μg/ml的对照品溶液，0.45 μm微孔滤膜过滤。分别精密吸取对照品溶液2.0，4.0，6.0，8.0，10.0 μl，按上述色谱条件测定，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程为Y=4 936 700.000 0X－40 780.000 0，r=0.999 9，进样量在0.10～0.50 μg范围内与峰面积呈良好线性关系。

样品的测定：分别取上述9份供试液10.0 μl进样，以与对照品相同的方法测定其峰面积，根据回归方程计算小檗碱的含量，并由此推算出各因素水平下提取液中盐酸小檗碱含量。

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2.2 多糖提取工艺的考察

2.2.1 单因素实验方法与结果 称取黄芪等方中其余4味药共65 g，置于1 000 ml圆底烧瓶中，在其他条件相同的情况下，分别测定浸泡时间、料液比、提取时间和提取次数对提取效果的影响，以多糖含量为指标。

浸泡时间的选择：固定条件：加8倍量水，冷凝回流1 h，提取1次。设定的5个浸泡时间分别为10，30，50，70，90 min，按照“2.2.3”项下方法测定吸光度，计算多糖含量分别为3.780%，4.222%，3.987%，3.718%，3.483%。结果表明，随着浸泡时间的延长，多糖得率逐渐增大，但在30 min时达到最大，时间再增加，由于杂质溶出增多，多糖得率反而降低。因此，浸泡时间以30 min为宜。

料液比的选择：合适的料液比不仅影响有效成分的提取，对生产成本也是一个很大的影响因素。固定条件：药材浸泡30 min，冷凝回流1 h，提取1次，本实验考察的料液比水平的情况分别为1∶6，1∶8，1∶10，1∶12和1∶14，得到其对应的多糖含量分别为3.707%，4.166%，4.973%，5.264%，5.477%。结果表明：随着料液比增加，多糖得率增加，但在料液比达到1∶10之后，多糖得率增加缓慢，因此，为降低后处理中浓缩的负担，减少能量消耗，料液比以1∶10为宜。

提取时间的选择：固定条件：浸泡30 min，加10倍量水，提取1次。考察提取时间分别为0.5，1.0，1.5，2.0，2.5 h与提取效果的对应关系，得到的多糖含量分别为4.323%，4.939%，5.690%，5.936%，5.846%。结果表明：随着提取时间的延长，多糖得率逐渐增大，但在1.5 h时之后，多糖得率增加缓慢，在2.5 h时开始下降，这是由于杂质溶出增多，且多糖容易糊化的结果。因此提取时间为1.5 h为宜。

提取次数的选择：固定条件：浸泡30 min，加10倍量水，冷凝回流1.5 h。考察提取次数从1次逐渐递增到5次与提取效果的对应关系，计算得多糖含量分别为5.723%，7.112%，7.773%，8.075%，8.243%。结果表明，随着提取次数的增加，多糖得率缓慢增加，但提取次数太多，会降低提取速率，增加成本和能耗，而且多糖的出膏率会很高，不利于颗粒剂的制备。因此，提取次数以1次为宜。

由以上单因素实验结果可知，多糖的优选提取条件可确定为：浸泡30 min，加10倍量水提取1次，提取时间为1.5 h。

2.2.2 多糖的含量测定采用苯酚-硫酸比色法［2］，在492 nm波长处测定吸收度，计算多糖的含量。

对照品溶液的制备及标准曲线的绘制：精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品0.998 7 g，置1 000 ml容量瓶中加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（0.998 7 mg/ml）。精密量取对照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0 ml，分别置50 ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密量取上述溶液各1 ml，置锥形瓶中，分别加入蒸馏水2 ml，6.25%苯酚溶液1 ml，混匀，迅速加入浓硫酸5 ml，摇匀，倒入具塞试管中，置沸水浴加热15 min，取出，冷却至室温，以第1份为空白，在492 nm的波长处测定吸光度。以吸光度（A）为纵坐标，葡萄糖对照品浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线，得标准曲线方程为A=0.006 9 C－0.007 3，相关系数为r=0.999 3，线性范围为19.974～119.844 μg/ml。

样品的测定：以上各单因素实验设计的多糖提取液离心后取上清液，将其定容至1 000 ml，取样品1 ml，置50 ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀，取1 ml，置锥形瓶中，分别加入蒸馏水2 ml，6.25%苯酚溶液1 ml，混匀，迅速加入浓硫酸5 ml，摇匀，倒入具塞试管中，置沸水浴加热15 min，取出，冷却至室温，在492 nm处测定吸光度，计算总多糖含量。

3 讨论

本实验主要从保留方中有效降血糖成分的出发点进行研究，在提取过程中分别考察了盐酸小檗碱和多糖的浸出量，得出了优选提取工艺条件为：黄连与其余4味药分开提取；黄连粗粉浸泡30 min后，用12，10倍量水提取2次，提取时间均为1.5 h；其余4味药一起提取，浸泡30 min，加10倍量水提取1次，提取时间为1.5 h。

此外，考虑到糖尿病患者的“禁糖”要求，应将本方制成无糖型颗粒剂。后期实验采用醇沉法将多糖提取液进行适当精制，并且采用真空干燥法干燥多糖浸膏，可以大大减少辅料的用量，从而减少服用量，符合无糖颗粒的一般特点。

篇（5）

结果：提取工艺为：取处方药材加12倍量水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成膏，即得。

结论：该提取工艺科学可靠，稳定性好，适合工业生产。

关键词：伤科跌打片 提取工艺 试验研究

Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.08.542

【中图分类号】R9 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2013）08-0466-02

伤科跌打片主要由三七、大黄、木香等中药组成。具活血散瘀，消肿止痛。用于跌打损伤、伤筋动骨、瘀血肿痛、闪腰岔气。[1]为了更好的控制产品的提取工艺，现对伤科跌打片提取工艺进行研究。

1 材料与仪器

制川乌、三棱（制）、莪术（制）、香附（醋制）、当归、续断、牡丹皮、蒲黄、防风、五灵脂（制）、红花、乌药、柴胡、地黄（购自安徽省亳州市药材总公司），柴胡皂苷a对照品（中国药品生物制品检定所，含量测定用，编号765-200104），所用试剂均为分析纯。

HPLC（岛津公司）；C18柱（250mm×4.6mm）。柴胡皂苷α对照品购自自中国药品生物制品检定所，甲醇为色谱醇；其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 正交试验因素水平的选择。

2.2 样品提取。称取制川乌15g、三棱（制）15g、莪术（制）15g、香附（醋制）15g、当归15g、续断15g、牡丹皮15g、蒲黄15g、防风15g、五灵脂（制）15g、红花15g、乌药11.25g、柴胡11.25g、地黄22.5g，共计210g，计9份，按L9（34）正交试验设计表格，加水煎煮，滤过，合并滤液，浓缩至适量，加水定容至1000ml，即得。

2.3 样品测定。

2.3.1 供试品溶液制备。精密吸取样品液25ml，置分液漏斗中，加石油醚（75℃）和醋酸乙酯各振摇提取3次，每次30ml，弃去石油醚层和醋酸乙酯层，用水饱和正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的氨试液洗涤2次，每次30ml，弃去洗液，分取正丁醇液置水浴上蒸干，残渣加甲醇使溶解，并定量转移至25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.3.2 对照品溶液制备。精密称取柴胡皂苷a对照品适量，加甲醇制成每1ml含柴胡皂苷a 45ug作为对照品溶液。

2.3.3 色谱条件。以乙腈-水（40∶60）为流动相，C18色谱柱250mm×4.6mm，5um，柱温：35℃，检测波长为210nm，流速1.0ml/min。

2.3.4 测定法。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20ul注入液相色谱仪测定，计算柴胡皂苷a的含量。结果见下表2。

2.4 结果分析。根据方差分析和极差分析的结果，各因素影响程度依次为B>C>A，因此优选出理论最佳条件为A3B3C3，因素C无显著性影响，且水平2和水平3之间的差距较小，并考虑缩短生产流程、降低成本的因素，将提取次数定为二次，即将处方药材加12倍水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，测定柴胡皂苷a的煎出量，并进行三批验证，其验证试验及结果如下表4。

上述试验结果表明，验证结果与正交试验结果基本一致，故提取工艺为：取处方药材加12倍量水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成膏，即得。该提取工艺科学可靠，稳定性好，适合工业生产。

篇（6）

通过研究和实践，切实提高了校内部分教师的专业化成长的进程。新课程的推进带给我们这样的感悟：课程改革的最大制约点是教师的专业水平。教师需要更新教育观念、需要提高教育能力，需要转变教育行为等，而传统的在职培训、学历达标等继续教育方式已经不能满足这一挑战的需求，我们的方向将更加的明确。教师们普遍感到原有方式缺乏主动性、针对性和实效性，对教师专业的提升效果不明显，那么，我们就要利用积极向上的精神去促进、提升教师的水平。因此采取了以下几种方法进行课题研究：

1．调查摸底法：实验之初，为了对实验教师的专业能力情况有一个具体的了解结合掌握，激发全体实验教师的实践意识和参与兴趣，我们采取对实验教师进行了全方位的调查和急需专业培训的具体建议的问卷，为本次活动奠定了较强的实践基础。

2．行动研究法：在实验开展过程中，号召全体实验教师针对教育活动和教育实践中的问题，在行动研究中不断地探索、改进改进工作，解决教育实际问题。将改革行动与研究工作相结合，与教育实践的具体改革行动紧密相连。

3．案例研究法：在实践活动中，注重教育活动中具有典型意义的，能够反映教育某些内在规律或某些教学思想、原理的具体教学事件的描述、总结分析，它通常是课堂内真实的故事，教学实践中遇到的困惑的真实记录。对这些"真实记录"进行分析研究，寻找规律或产生问题的根源，进而寻求解决问题或改进工作的方法，或形成新的研究课题。在案例法的研究中，培养研究者自身的洞察力是关键。

4．实　验　法：实验教师在教育教学过程中从已有的理论和经验出发，形成某种教育思想和理论构想，然后将形成的假说在积极主动有计划有控制的教育实践中加以验证。通过对实验对象变化、发展状况的观察，确立有效的验证和完善假说。形成研究制定严谨科学的实验方案，按照方案实施实验形成实验的阶段性报告和总结性报告，然后对实验进行评价论证。

5．经验总结法：指导实验教师根据教育实践所提供的事实，分析概括教育现象，挖掘现有的经验材料，并使之上升到教育理论的高度，以便更好地指导新的教育实践活动。从而引领教师能够从透过现象看本质，找出实际经验中的规律；从而更好地更加理性地改进自己的教学。

在实验的工程中，我们首先加强了对课题组成员的业务培训。其次切实加强了课题研究的协调。另外，我课题组加大班主任教师的总结提升能力的训练，引导教师不仅能扎实工作在自己的岗位上，而且对于一些较为成型的经验能勤于总结，敢于提升，经常交流发表。三年来，在实验过程中，我们时刻意识到：

（一）班主任的职业道德和敬业精神是班集体建设的精神支柱

篇（7）

【关键词】   癌痛消颗粒 总黄酮 野黄芩苷 醇提工艺 正交实验

    癌痛消颗粒的处方源于广西中医学院韦艾凌博士十多年的专病特色方癌痛消散，由白花蛇舌草、半枝莲、三棱、乌药、元胡、香附、枳壳、黄芪、党参、甘草等药组成，具有消积化瘀、清热解毒、行气止痛、健脾益气的功效，能明显改善肝癌早中期患者的临床表现如肝区疼痛、腹胀、纳呆、神疲乏力、舌瘀暗脉弦涩以及并发症腹水等，并且还能改善患者的生存质量，显示出了良好的抗癌疗效前景。动物实验研究显示,癌痛消胶囊对小鼠h22移植性肝癌有抑瘤作用，抑制肿瘤生长的机理可能与下调vegf，p53和p21ras基因表达的水平，诱导肝癌细胞凋亡有关［1，2］。为了使该方剂能够较方便的应用于临床，根据各药味所处的地位和药物成分的特性，拟将癌痛消散各味药用合适方法提取后制成颗粒。本实验通过正交实验探讨癌痛消颗粒醇提工艺，以寻找最佳的提取工艺条件。

1   仪器与材料

    日本岛津lc-10atvp型高效液相色谱仪，威玛龙色谱工作站；岛津spd-10avp紫外检测器，mettleram100 电子 天平。

    甲醇为色谱纯；水为超纯水（自制）；其他试剂为分析纯。

    野黄芩苷对照品（110842-200605）及芦丁对照品（760706）均购自 中国 药品生物制品检定所；各药材均购自南宁市医药有限公司，经广西中医学院鉴定教研室韦松基教授鉴定。

2  方法与结果

2.1  因素水平的确定根据药物的特性并结合生产实际，醇提工艺选取了对提取影响较大的乙醇浓度、加醇量、回流次数及回流时间作为考察因素，选用l9(34)正交实验表进行重复实验（n=2）。结果见表1。表1   因素与水平（略）

2.2  指标的确定考虑到复方多成分作用的特点及方中君药成分簇群的生物特性，选择总浸出物、总黄酮及野黄芩苷作为综合评价指标。见表2。

2.3  总浸出物的测定［3］将药材适当的粉碎，按处方的比例要求精密称取白花蛇舌草、半枝莲药材共3 g 9份,按正交表1选择的条件回流提取,合并各份提取液，过滤，旋转蒸发回收乙醇，水浴锅上水浴蒸干，105℃干燥3 h，置干燥器中冷却0.5 h，迅速精密称定重量。浸膏得率(％)=浸膏重/样品重×100％。结果见表2。

2.4  总黄酮的测定［3，4］

2.4.1  供试品溶液的制备按处方比例精密称取白花蛇舌草、半枝莲等药材共约5.1 g 9份，分别按各组的工艺要求提取后,将提取液浓缩至30 ml,加石油醚30 ml萃取3次,分取水层并蒸干,残渣加甲醇80 ml分多次溶解后过滤,滤液移至100 ml量瓶中,另用甲醇20 ml分数次在分液漏斗中洗涤并过滤残渣,洗液并入量瓶中,加甲醇至刻度，作为供试品溶液。

2.4.2  对照品溶液的制备精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品50 mg，置25 ml量瓶中，加甲醇20 ml至水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀。精密吸取10 ml，置100 ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得（每毫升含无水芦丁0.2 mg）。

2.4.3  测定精密量取对照品1，2，3，4，5，与6 ml，分别置25 ml量瓶中，加水6 ml，加5%亚硝酸钠溶液1 ml使混匀，放置6 min，加10%硝酸铝溶液1 ml，摇匀放置6 min，加氢氧化钠试液10 ml，再加水至刻度，摇匀，放置15 min，照分光光度法，在500 nm的波长处测定收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。另精密量取样品1.5 ml，置25 ml量瓶中，照标准曲线制备方法，自“加水6 ml”起依法测定吸收度，从曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量(mg)， 计算 ，即得。结果见表2。

2.5  野黄芩苷的测定［5］

2.5.1  色谱条件色谱柱为kromasil c18 柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-3%乙酸（30∶70），柱温为室温，检测波长335 nm，流速1.0 ml/min，进样量10 μl。

2.5.2  对照品溶液的制备精密称定野黄芩苷对照品2.61 mg，置25 ml量瓶中，加甲醇完全溶解并稀释至刻度，摇匀，备用（每毫升中含野黄芩苷0.104 4 mg）。

2.5.3  供试品溶液的制备 取“2.4.1”项下样品，以微孔滤膜过滤，为供试品。

2.5.4   测定精密吸取供试品溶液和对照品溶液各10 μl，注入hplc色谱仪，记录峰面积，按外标法 计算 野黄芩苷的量。结果见表2。表2  样品中各指标的测定结果（略）

2.6  公式评分在正交实验结果的总体评价中，以野黄芩苷含量和总黄酮含量为主 (各占 50％和30%)，浸膏得率为辅 (占20％)。再按正交实验分析法中多指标分析的公式法，对结果进行计算得到公式评分值，以此对评价指标进行综合评判及方差分析，最佳提取工艺是 a3b3c3d2 。结果见表3。表3  正交实验结果和分析（略）

2.7  正交设计实验结果分析按方差分析理论得方差分析结果见表4。表4表明乙醇浓度、乙醇量及回流次数有极显著差异。回流时间没有显著差异。表4  方差分析（略）

2.8  验证实验为了进一步验证正交实验结果的准确性，以确保提取工艺合理可行，按上述工艺条件a3b3c3d2，重复安排3批试验。结果见表5。表5  验证实验（略）

    验证结果表明，按水提工艺a3b3c3d2所提得的浸膏得率、总黄酮含量以及野黄芩苷含量都接近正交实验中的最大值，表明此工艺稳定，具有重复性和可操作性。

3  讨论

    采用正交设计，确定了醇提工艺的最佳条件，即：称取醇提取部分药材，加入10倍量80％乙醇回流提取3次，回流1.5 h/次。 正交结果分析， 65％乙醇和 80％乙醇的提取结果已相当接近，但使用65％乙醇提取浸膏得率虽高，野黄芩苷和黄酮含量并未无显著提高，而且过滤困难，说明浸膏中无效成分较多，而80％乙醇提取浸膏中野黄芩苷及黄酮含量高、杂质少、操作方便；溶剂量及提取时间对各有效成分提取影响显著,提取时间随着时间增加,有效成分反而减少,故将提取时间定在1.5 h。综合考虑提取条件为：用 10倍量的80％乙醇,回流提取3次,为1.5 h/次。

【 参考 文献 】

 

篇（8）

乙型病毒性肝炎是由乙肝病毒（HBV）引起的、以肝脏炎性病变为主，并可引起多器官损害的一种疾病，也是我国当前流行最为广泛、危害性最严重的一种疾病。中医药是我国的特色和宝库，在治疗病毒性肝炎方面发现了不少有效的单方和复方制剂。

乙肝宁颗粒是基于理论研究和临床观察，将黄芪、党参、白花蛇舌草、绵茵陈等13味中药按君、臣、佐、使进行配伍而制成的复方颗粒剂。具有补气健脾，活血化瘀，清热解毒的功效，用于慢性乙型肝炎[1]。文献报道[2-8]临床上应用乙肝宁颗粒治疗慢性乙肝疗效较好。伍一文[9]等对其保肝、降酶、抗鸭乙肝病毒及免疫功能等作用进行了实验研究。为探讨乙肝宁颗粒抗乙肝病毒作用，本文用HepG⒉⒉15细胞株为模型，考察了用药后细胞培养上清液中乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、E抗原（HBeAg）的改变，并采用荧光定量PCR法考察其对HBV DNA的抑制效果，评价其抗HBV活性。

1 材料

⒈1试药 HepG⒉⒉15细胞株 （购自上海细胞所），乙肝宁颗粒（九芝堂股份有限公司，购于东方大药房，批号130124），拉米夫定（3TC，葛兰素史克制药有限公司，批号13020027），HBeAg诊断试剂盒（批号201304035）和HBsAg诊断试剂盒（批号201307009）（上海华泰生物工程公司）、HBVDNA荧光定量PCR检测试剂盒 （批号20130617）（上海科华生物工程股份有限公司）。四甲基偶氮唑盐（Sigma USA），MEM培养基粉、丙酮酸钠、胎牛血清（上海韵涵生物科技有限公司）、G418（Gibco，USA），Tryple express（Invitrogen，USA），

⒈2仪器 荧光定量PCR仪（ABl7500，ABI，USA），CO2恒温培养箱（Thermo Fisher，USA），-80℃冰箱，酶标仪，倒置显微镜（德国Leica公司），生物安全柜（上海振梓创空气净化设备有限公司）。

2 方法

⒉1细胞模型[10] HepG⒉⒉15细胞株（购自上海细胞所），细胞用MEM培养液（含10%胎牛血清，500 mg・L-1G418），置37℃，5%CO2恒温培养箱中培养，隔3d换液，6d传代1次。待HBV DNA表达稳定后开始实验。

2.2乙肝宁颗粒溶液与3TC溶液的配制 将乙肝宁颗粒研细，准确称取乙肝宁颗粒粉末，3TC适量，溶解于无菌双蒸水中，按每次用量分装成若干份，保存于-20℃冰箱中，用时取出一份，用含2%胎牛血清，500mg・L-1 G418的培养基稀释制备成质量浓度分别为25mg・L-1，50mg・L-1，100mg・L-1，200mg・L-1，400mg・L-1的乙肝宁颗粒溶液，以及质量浓度分别为100mg・L-1，10mg・L-1，1mg・L-1，0.1 mg・L-1，0.01mg・L-13TC的溶液。

⒉3药物细胞毒性实验 参照Mosmann建立的四甲基偶氮唑盐法（MTT）[11]，检测药物对HepG⒉⒉15细胞生长的抑制作用。具体方法为HepG2.2.15细胞1瓶，用胰酶消化后制备成单细胞悬液，计数后调整细胞浓度至3.0×106cells・mL-1。加入96孔培养板中，每孔100μL。培养板置于细胞培养箱中，37℃、5%CO2培养过夜待贴壁。吸去上清后分别加入乙肝宁颗粒供试品溶液和3TC溶液的DMEM培养基（含10%胎牛血清，pH 7.2），每孔100皿，每个浓度3复孔。同时设不加药物的细胞对照组。同条件下继续培养，每天收取上清液（-80℃冰箱保存）并更换原浓度新鲜药液，共加药培养9d。9d后，采用MTT法，测定570nm的吸光度（A），观察药物对细胞的毒性。实验重复3次，计算细胞存活率，按Reed-Meuench法[12]计算半数有毒浓度Tc50和最大无毒浓度TC0。TC50即细胞存活率为50%时的药物浓度；一般认为在药物作用下若细胞存活率>95%，此药物浓度即为TC0，对培养细胞无毒性，为药物作用的安全无毒性[13]。公式如下：细胞存活率%A570（样品）/A570（对照）×100%

TC50Anti log[logB+（50-B）的抑制百分率/（A-B）的抑制百分率×C]×100%

其中A570（样品）为加入乙肝宁颗粒供试品或3TC后的细胞吸光度，A570 （对照）为空白对照的细胞吸光度，A≥抑制50%药物浓度，B≤抑制50%药物浓度，C=log稀释倍数。

⒉4药物抗HBV实验 HepG⒉⒉15细胞用胰酶消化后制成单细胞悬液，调整细胞浓度至3.0×104cells・mL-1加入到96孔细胞培养板中，每孔1mL，37℃、饱和湿度，5%CO2培养过夜，于48h后换入不同浓度的乙肝宁颗粒和3TC的DMEM混合培养液培养9d，9d后将细胞消化冻存于液氮罐中。实验同时设3孔无药物细胞对照，并重复3次。第9d收集各孔上清液至1.5 mL离心管中-20℃冻存，待检测HBsAg、HBeAg的水平和HBV DNA的含量。

⒉5HBsAg，HBeAg的检测 采用ELISA法检测上清液中HBsAg，HBeAg，实验操作按试剂盒说明书执行。每个样品平行3次，实验重复3次。结果按下列公式计算抑制率。抑制率%=（A对照组-A用药组）/A对照组×100%

⒉6 HBV DNA的检测 采用FQ-PCR法检测上清液中细胞外和细胞内HBV DNA的含量，实验操作按试剂盒说明书进行。每个样品平行3次，实验重复3次，结果取平均值。结果按下式计算抑制率：抑制率=（对照组HBV DNA量-用药组HBV DNA量）/对照组HBV DNA量×100%

⒉7药物效果评价 药物抗HBV活性用选择指数（Selectivity Index，SI）进行评价[14]。SI=TC50/IC50。IC50（半数有效浓度）表示抑制率为50%时的药物浓度。当SI>2时，表明药物有效低毒；当1≤SI≤2时，提示药物低效低毒；当SI

⒉8统计学处理 结果以（x±s）表示。采用SPSS13.0软件进行方差分析，P

3 结果

⒊1乙肝宁颗粒和3TC对HepG⒉⒉15细胞毒性作用 不同浓度的乙肝宁颗粒和3TC对HepG⒉⒉15细胞的毒性作用见表1。

从表1中可以看出，乙肝宁颗粒在200mg・L-1浓度下，细胞存活率>95%，即TC0=200mg・L-1，可认为乙肝宁颗粒在此浓度下对HepG⒉⒉15细胞基本无毒性，而3TC只有在0.01mg・L-1浓度下细胞存活率>95%。同时可以知道，乙肝宁颗粒在400mg・L-1 浓度下，3TC在100mg・L-1浓度下对细胞活力的抑制作用均小于10%，说明在此浓度下，乙肝宁颗粒和3TC均无明显细胞毒性，可用于观察药物对细胞中HBV复制的抑制作用。

⒊2乙肝宁颗粒和3TC对Hep G⒉⒉15细胞分泌HBsAg，HBeAg的影响 根据药物细胞毒性实验确定了药物浓度范围。选择1，3，5，7，9 d加药后收集的细胞上清液作为样品，用ELISA法检测其中HBsAg，HBeAg分泌情况（见表2～5）。

由结果可知，不同浓度的乙肝宁颗粒溶液与3TC溶液对HepG⒉⒉5细胞分泌HBeAg，HBsAg均有抑制作用，且随着药物浓度的增加，其抑制率也逐渐增加。在同一浓度下，乙肝宁颗粒对HBeAg的抑制作用均强于HBsAg，作用9d后，质量浓度为400mg・L-1乙肝宁颗粒溶液对HBeAg，HBsAg的抑制率分别为25.93%和45.44%，而质量浓度为100 mg・L-13TC溶液对HBeAg，HBsAg的抑制率分别为25.93%和19.86%，说明乙肝宁颗粒对HepG⒉⒉5细胞分泌HBeAg，HBsAg的抑制作用强于3TC。

⒊3乙肝宁颗粒和3TC对HBV DNA的抑制效果 选择最后一次得到的上清液和药物处理的细胞作为样品，通过实时定量PCR检测细胞上清液中病毒载量， 考察乙肝宁颗粒和3TC对HBV DNA的抑制效果（见表6）。

由结果可知，乙肝宁颗粒对HepG⒉⒉5细胞分泌的HBV DNA有较为显著的抑制作用，随着药物浓度增加，其抑制作用亦增强，除药物浓度为25mg・L-1的乙肝宁颗粒组外，其余组别与细胞对照组比较P

3.4药物效果评价结果 乙肝宁颗粒对HBeAg 的SI为>20，对HBsAg 的SI为>24，表明乙肝宁颗粒能够显著抑制对HepG⒉⒉5细胞分泌HBeAg，HbsAg，具有较强的体外抑制HepG⒉⒉5细胞表达HBV抗原的作用，提示乙肝宁颗粒在体外实验中有抑制HBV的作用。

4 讨论

乙型肝炎是一个世界性的公共卫生问题。中国每年约有35万人死于慢性乙肝相关的疾病[15-16]。目前治疗乙型肝炎主要采用抗病毒治疗，其药物主要包括干扰素和核苷类似物两类，亦取得了一定疗效。但由于其毒副作用导致应用受到较大的限制，因此积极开发安全有效，毒副作用小，疗程短，费用低的抗HBV药是目前亟待解决的问题，而中医药是我国的特色和优势，对治疗慢性乙型肝炎积累了一定的经验，发现了不少有效的单方或者是复方，为筛选理想的抗HBV药物提供了思路和希望。

本实验采用HepG⒉⒉15细胞株体外培养方法，观察受试药物对乙型肝炎病毒的HBsAg、HBeAg分泌的抑制作用以及对病毒核酸的抑制作用。HepG⒉⒉15细胞是带有G418抗性基因片段与含HBV DN重组质粒转染人肝癌细胞系（ HepG2）的2.2.15细胞系，能在体外长期培养，稳定、高水平地分泌HBV颗粒（ Dane颗粒）、HBsAg，HBeAg以及 HBVDNA，并能产生大量复制中间体，再现 HBV 在肝细胞中的复制和表达[17]。用该细胞系进行抗HBV药物筛选，结果可以比较准确地预测药物在人体内的作用，是目前国内外公认和常用的体外评价HBV药物的细胞模型，现已成为申报抗新药必须做的体外实验模型[18-21]。

实验中以拉米夫定（3TC）为阳性实验对照药物，是目前治疗病毒性肝炎的常用药物[22-23]。其主要作用机制是进入细胞内后磷酸化成拉米夫定三磷酸盐（L-TP），与脱氧胞苷三磷酸（dCTP）竞争结合位点，抑制HBV逆转录酶的活性，阻断合成新HBV DNA的链化，达到抑制HBV复制的目的[24]。但存在治疗乙肝时用时长，易产生耐药性，毒副作用大，停药后易反弹等问题。实验结果表明，3TC抗HBV病毒的效果虽然优于乙肝宁颗粒，但其细胞毒性亦比乙肝宁颗粒强得多。乙肝宁颗粒由黄芪、白花蛇舌草、茵陈、首乌、丹参、茯苓、白芍、党参等组成。黄芪补气升阳、利水消肿；白花蛇舌草清热解毒，利湿；茵陈清热利湿、退黄；金钱草清利湿热，利水通淋，除湿退黄；首乌养血滋阴、解毒通便；党参健脾益肺、养血生津；白芍平肝柔肝、缓急止痛；茯苓利水渗湿、健脾和胃；丹参活血祛瘀、清心除烦。此方共成调气健脾、滋养肝肾、利胆清热、活血化瘀之法则，在抑制病毒复制的同时提高机体免疫力，降低药物对机体的损伤，并可促进正常肝细胞的恢复与再生。

采用HepG⒉⒉15细胞株体外培养方法，实验条件易于控制、研究结果均衡性较好。但离体体外实验不能完全反映体内所特有的免疫调节和药物在体内的代谢情况。因此，此实验研究虽显示乙肝宁颗粒具有较好的对HBsAg、HBeAg分泌的抑制作用以及对病毒核酸的抑制作用。

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[21]Olbert P， Weber J， Hegele A， et al. Combining lithoclast and ultrasound power in one device for percutaneous nephrolithotomy：in vitro results of a novel and highly effective technology[J].J Urol，2003，61⑴：55-59.

篇（9）

校本教育科研课题立项

申报书

课题名称农村民间艺术在校园特色文化中的运用策略研究

单位名称 XXXXXXXXXXXXXXX

申报 人 XXXX

申报日期 2020年9月1日

填表说明

一、每项课题限报申报人一名。课题申报人即课题负责人，必须是该项目的实际主持者和实际管理人，并在该课题研究中承担实质性任务。

二、每一申报人同一时间内只能承担一项校本研究课题。

三、课题研究小组主要成员是指除课题申报人之外的直接参加本课题研究工作的人员，不包括科研管理等人员。

四、申报书须经学校课题管理小组审核，签署明确意见，教科处加盖公章后方可立项。

五、本表数据申报人必须逐项认真填写。若某项表格内容较多，可适当调整表格大小，但要保持整个申报表的美观。

分栏目填写说明：

课题名称：应准确简明，反映研究内容，最多不超过32字（包括标点符号）；

申报编号和立项编号：申报人不用填写；

预期成果：指预期取得的最终研究成果形式，其中必须包含研究报告。成果形式指：专著、研究论文集、研究报告、电脑软件（网站）、其他。

六、填写本表须先下载电子文档，在电脑上填写完毕后打印，手写无效。凡签名和签章处，不得用打印字和印刷体代替。

七、本表交送一式二份。请用A4纸双面打印，于左侧装订成册。封面请勿用塑料封皮。

八、申报人在报送本申报书时，须同时将电子稿发送至学校教科处。

一、数据表

课题名称

农村民间艺术在校园特色文化中的运用策略研究

课题

申报人

姓名

职称、职务

电话

课题研究小组 人 员

姓名

工作单位

出生年月

职称、职务

在课题研究中承担的任务

签名

负责人曾担任或参与过哪些教育科研项目研究，完成情况如何

课题级别

课题名称

批准时间

在课题中的分工

是否结题

课题研究人员近5年发表或出版的主要论文或著作

论文或著作名称

出版部门或发表报/刊

作者

日期

二、课题论证

（一）本课题提出的研究背景、价值及意义、理论依据和实践依据

本课题提出的背景：农村民间艺术是是我国广大农村同胞长期生活的智慧和艺术的结晶，是我国艺术的瑰宝，更是中华优秀农村民间艺术的重要组成部分，也是校园文化的重要源泉和基础。把农村民间艺术引进校园，不仅是对农村民间艺术的传承和发扬，也是创建特色校园文化的重要内容。农村民间艺术来自于民间，是社会主义精神文明建设的重要体现，是农村精神文明建设的窗口。伴随着社会主义市场经济的发展， 农村民间艺术对促进农村的“两大”文明建设显得十分重要。目前，我国农村民间艺术的建设存在着诸如门类发展不平衡，门类消失，资金馈乏等问题，严重地影响了民间艺术的发展。因此，进一步了解农村民间艺术现状，找准症结，解决好民间艺术所面临的问题，将农村民间艺术与校园特色文化结合，通过校园更加有效的使农村民间艺术得以教学、传承是极为重要的。现阶段我国农村民间文化与校园文化结合的发展困境1.农村民间艺术师资问题教育成功与否与师资关系密切。当前农村民间艺术教师师资主要面临三大问题：“缺、弱、差”。“缺”是缺乏能教授传统技艺课的教师，如书法、茶艺、戏曲等。“弱”是指仅少部分教师具备一定的农村民间艺术素养，多数中小学教师在农村民间艺术内容方面基础薄弱。“差”是指教师教学的效果差，甚至“一讲就错”的现象极为普遍。2.农村民间艺术课程设置问题受国家政策导向影响，学校大力宣传优秀农村民间艺术进校园，导致校园变成了“大杂烩”。农村民间艺术课程设置更是五花八门，由于农村民间艺术历史悠久、博大精深，课程设置易散乱，不能形成统一的体系，导致学生学习效率不高。3.农村民间艺术教育边缘化问题在扑面而来的升学压力下，大多数学校领导及教师依然以应试教育为导向，不少学校围绕应试教育的内容，有选择性、针对性地进行考点灌输，所以学生对古代优秀农村民间艺术的学习仅是蜻蜓点水，没有深入和系统学习。其次，在“重成绩轻文化”的社会背景下，基础教育管理者对农村民间艺术认识不清，片面追求学校“升学率”，加之农村民间艺术师资也匮乏，导致不少学校纵然有其心，也无力执行。最后，尽管许多学校积极开展“优秀农村民间艺术进校园”的宣传活动，但是学校在实际开展此类活动时，也是重形式轻内容的“一阵风”。甚至有些学校认为优秀农村民间艺术教育加重了学生学业负担，所以配备两份课表来应付教育部的突击检查。课题研究价值及意义：1.农村民间艺术源自于历代的人民群众勤劳智慧的结晶，是对现实生活的真实的认知与体验，蕴含着丰富多彩的历史人文知识。因此，将农村民间艺术较好的渗透到小学美术教学当中，能够提供给小学美术教学较为丰富的素材，让学生能够快乐的学习美术。例如：农村民间艺术教学当中，教师可通过讲述民间传说故事，来有效地拓展学生的创新思维能力，让学生获得进行美术创作的丰富素材，让学生借助于绘画充分地表达将对美的真实感悟。2.将农村民间艺术较好地渗透到小学美术教学当中，既可让学生深入地理解与掌握在传统艺术当中如何来有效的应用线条、色彩等美术元素，还能够让学生在现实生活当中紧密联系所学的美术知识。形成生活化的美术教学，让学生能够深入的理解与掌握美术知识与技能。例如，教师在开展农村民间艺术教学当中，就可充分运用京剧艺术来作为导入内容，来让学生认知与了解色彩所蕴含的意义。

（二）研究的预期目标和主要内容课题研究的预期目标：总体目标：对于当代的小学生，美术老师应不断地为他们传授农村民间艺术传统文化中的精髓，让学生能够把我国传统文化继续良好地传承下去，充分结合小学生好奇心强、动手能力强等特点，让他们在美术课堂中进行学习中国结、中国画、剪纸等农村民间艺术，让他们感受到我国传统文化的艺术气息，提高其思维能力。成果状态目标1.通过本课题的研究与实践，探索农村民间艺术在校园课堂教学中学生活动组织的策略。2.通过学生活动组织策略研究过程中，使留守儿童在身心健康以及学习方面得到均衡的发展。3.积累农村民间艺术教学案例，为课题研究提供实践范例。4.撰写论文，在实践探索中的基础上，对课题研究成果与问题作出理性思考与实践，提炼出富有价值的经验与理论。5.通过本课题的研究与实践，提高我校在农村民间艺术教学的教导能力及专业素养。培养学生具备良好的学习品质，掌握科学的学习方法，提高学习能力，使教师的教学效果得到社会的肯定。6.通过本课题使更多的农村民间艺术被学生学习，助力农村民间艺术的传承和发展。研究的主要内容：在美术课外教学中积极渗透农村民间艺术元素除了课堂教学中有机渗透农村民间艺术元素外，要充分利用课外活动时间，结合美术教师的特长，开展国画、书法、剪纸、版画、中国结、年画、脸谱、泥塑等艺术学科。（1）中国结是中国特有的民间手工编结装饰品，它的制作方法、材质、图形等都有着鲜明的民族特色和严格的制作工艺。其生动优美的造型以及色彩的和谐搭配，都得到大家的喜爱。中国结最大的特点是成本低、工具少、材料简单多样、好学易做。（2）中国画在构图、用笔、用墨、敷色等方面，也都有自己的特点。在用笔和用墨方面，是中国画造型的重要部分。国画以它特有的工具材料，出现别具一格的面貌，吸引了部分爱好者。根据孩子们的年龄特点，我们除了讲解传统绘画技法技巧，欣赏大量名家名作，还结合现代审美思想，以彩墨游戏的方式学习，学生在自由创作中，体验国画的独特魅力，保持很高的积极性。（3）剪纸是一种镂空艺术，是中国最普及的民间传统装饰艺术之一，有着悠久的历史。它可以用于点缀墙壁、门、窗、房柱、镜子灯和灯笼等。常用的方法有两种，剪刀剪和刀刻。我们把剪纸作为特色活动来开展，学生利用课堂和业余时间进行练习。（4）互联网+教育融合农村民间艺术与美术教学。互联网信息时代是对教育的新变革，同时也是农村民间艺术继承与发展的关键点，如何把握与实践好教师的辨别与实践尤为重要。农村民间艺术美育教学对接互联网+教育进课堂，随着时展，科技进步，互联网纵横的世界，互联网+教育走进小学课堂，美术课堂丰富多彩，传统文化艺术轻松渗透美术教学当中，以节日、主题、风土人情等角度出发打造文化课堂，尤其对于小学阶段学生提高绘画兴趣的同时，创设宽松的谈话环境，引导孩子去观察、想象、思考，在实际操作中摸索绘画的语言，老师作为助教给予学生适当的引导，把农村民间艺术的元素融入创作，在不断变化着的创意美术中，与农村民间艺术有效连接。

（三）课题研究方法、研究思路，预计突破的重点难点研究方法：1.农村民间艺术是现代文化的基础，从中小学美术教材了解可知，中小学美术教育不仅仅是美术技能技巧的传授，而应该是在一种文化观的观照下学习，应该让学生在一种文化情境中理解美术。对于农村民间艺术的农村民间艺术，我们应当充分地加以利用，使农村民间艺术有所继承，有所延续，有所创新，有所发展，并取其精华融入到教育过程始终，发挥其巨大作用。农村民间艺术与美术是母与子的关系。美术是农村民间艺术之子，则必然存在着农村民间艺术的基因，那么通过对美术的了解也能了解孕育它的母体。为了更好地通过美术了解农村民间艺术，也为了更好地通过农村民间艺术了解美术，可以让中小学美术课程走进农村民间艺术，二者相互联系、相互促进，从而陶冶学生的性情和心灵，为修炼完美的人格与高尚道德情操打下扎实的基础。2.美术是人类文化的一个重要组成部分，与社会生活的方方面面有着千丝万缕的联系，从优秀的中小学美术教材了解可知，与农村民间艺术有关联的课程逐渐增多，将现在所缺失的农村民间艺术的传统知识揉合到美术教育中去，让艺术生活化，让文化与教育不再脱节，让农村民间艺术的加入成为一种生活习惯。所以，在缺少情感与关怀的信息时代，具备人文关怀特征的农村民间艺术被慢慢记忆起来。学校美术教育在这一时刻肩负重任，通过美术教学，让学生了解民族传统艺术文化和对于培养自身的思想道德素质，以及自身的审美观念，都有极为重要的价值，激发珍惜美术遗产、关爱民族文化的情感。因此,美术学习绝不仅仅是一种单纯的技能技巧的训练，而应视为一种文化学习。通过美术的学习，使学生认识人的情感、态度、价值观的差异性，并在一种广泛的文化情境中，认识美术的特征、美术表现的多样性以及美术对社会生活的独特贡献。3.美术技法教学中教材要求对学生安排一定内容的临摹写生、创作等课业实践，应该说，这是对学生农村民间艺术教育的一个最好时机，使学生基本了解和初步掌握我国传统美术形式的主要特征和技能技法。中国画是我国历史悠久的传统绘画，为东方绘画的主流，它不仅在材料、题材和技法上具有鲜明的民族特点，更重要的是这种绘画形式承载着丰富的文化内涵。所以在中国画技法教学中渗入农村民间艺术，可以说是一条行之有效的途径。教学时，教师可以根据中国画艺术特征，在讲述其基本技法的过程中指导学生进行具体的临摹或写生实践。如在辅导某一作品临摹或某一实景写生时，教师可围绕作品外在形式的美、围绕其写生场景，结合直观演示向学生讲解中国画艺术特色及其技法特点。同时强调文学、书法、篆刻与绘画的有机结合；在创作过程中，从观察生活、学习中表现形式上都有它独特之处等要点。通过这样的讲解，使学生对中国画艺术特点有较深的认识，便于学生从艺术美学角度来加深理解、掌握和理解传统绘画的表现手法及技能技巧。研究思路：现阶段小学美术教师大部分是专业美术院校毕业，有着对农村民间艺术学习的能力和基本知识的掌握。首先剔除教育界对于农村民间艺术在美术方面的认识不足，运用新的视角对审美能力和实用角度评价的提升，在农村民间艺术的艺术形式和内容中下功夫。一幅好的作品诞生从艺术创作的灵感还是情感，艺术形式的表现都需要一个本源，那就是农村民间艺术的体现，教师必须依据农村民间艺术的农村民间艺术实际教学，尤其是对于小学阶段，美育对孩子的启蒙教育至关重要，在新的环境下用好信息化更加使学生对课程充满期待性，发挥学生主体作用在自己的实践中获得收获，教师作为引导和参与者，利用有效课堂时间，完成教学目标，在实际教学中形成体系，任何一个美术教育的点不可能一节课达到目标，放开对美术教本的依赖，多角度全方位的去达到让农村民间艺术进课堂的实践活动。研究对象及范围：本校教师与小学学生预计突破的重难点：重点：1.积累教学案例，为教学研究提供实践范例。2.根据农村民间艺术发展背景的特点，寻求各个课型、各个课堂环节中学生活动的有效组织模式与策略，并在教学中进行实践操作和归纳总结。难点：通过本课题的研究与实践，提高我校农村民间艺术的教学能力及专业素养。培养学生具备良好的学习品质，掌握科学的学习方法，提高学习能力，使教师的教学效果得到社会的肯定。课题所要解决的主要问题：1.以教师的备课策略、上课策略、评估策略的研究为主线；2.以学生对学习兴趣、情境、问题、合作、探究、练习、实践等的学习意识为辅线；3.探索出提高学生学习活动的教学策略。研究计划和安排 第一阶段（2020年10月至11月） 研究准备阶段 该阶段是课题研究的初始阶段，主要是为课题研究的启动准备理论、环境、氛围、研究队伍组建等条件，使老师进入科研状态，形成并了解课题的总框架，掌握相关的基本理论，课题设计人员收集资料，论证、确定课题实验方案，填写课题申请书，做好申报工作。第二阶段（ 2020年12月） 课题论证和立项阶段 在调查研究的基础上，对课题进行论证，确定课题，组建课题组，设计研究方案，申报课题，组织开题报告会，进行课题开题。 第三阶段（2021年1月至2021年10月） 研究实施阶段 组织开题讨论、咨询、制定阶段实施规划，按计划分子课题组实施研究，注意过程动态管理、调控。在这一阶段中，进行实验研究交流和培训活动，开展案例分析、教学设计、撰写经验论文活动，收集优秀课例、完成教学设计、论文等。写出阶段性总结报告，进行阶段成果评估，组建课题研究档案及课题研究汇报集。第四阶段（2021年11月至12月）结题推广总结阶段 总结二年来在农村民间艺术与校园特色文件运用教学过程中学生活动组织策略探索的成果，整理分析实验资料，进行总结提炼和实验成果的综合评估，撰写结题报告，完成课题结题鉴定。把农村民间艺术在校园特色文化中的运用方法进一步优化、固化，让农村民间艺术得以传承，让学生快乐、健康成长，全面实施素质教育。 研究的预期成果 （一）文本及声像类成果 1.研究成果集，含论文集、案例集、教学设计精选、课题研究报告等。2.课堂活动实录光碟、图片、简报等。 （二）实践类成果 1.试验学生的学习效率得到提高。 2.课题组教师的研究能力得到提高。3.学生活动比赛等成绩成果。保证措施 1.成立专门的领导机构，校务会主任任组长，领导、组织、协调课题组工作。教导主任任副组长，全面负责课题研究的相关工作。 2.校务会领导十分重视科研工作，为适合教师自身的特点，将拨出资经让老师订适合自己的教育教学方面的书籍，这样订阅的面更为广泛，老师们从书上可以获取更多的研究资料。不仅如此，现今是一个信息化的时代，老师们也可以从信息网上获得更多的资料。 3.学校的硬件设施较好，有多媒体教室，每间教室都配备了班班通设备。4.为保证本课题研究能顺利地展开，取得好的成果，校务会将投入必要的经费，用于举办各种培训，开展各项活动，对教师科研成果的奖励，出版教师研究成果、论文等。 推广范围： 本区乃至本市村小学校

（四）课题研究实施阶段划分及预期研究成果

序号

研究阶段

起止时间

阶段成果名称

成果

形式

承担人

1

2

3

4

5

6

7

8

预期成果（最多限报3项）

序号

完成时间

最终成果

名 称

成果形式

负责人

本课题预计研究周期：

中期检测时间

年 月

终期结题时间

年 月

篇（10）

综上所述，就业指导模式的全程化在运用分阶段、分层次的就业指导体系的探索、模式的基础上，实现由“自然的我”―“社会的我”―“职业的我”的角色转变，形成了符合医科院校的科学、完善的就业指导服务体系的整体规划，有利于医学院校就业指导工作朝着科学化、专业化的方向发展。

二、就业指导课程师资专业化

就业指导课程是高校对学生开展就业指导的主阵地，就业指导师资队伍建设直接影响课程质量，那么如何加强就业指导课程师资专业化成为各高校就业指导课程建设的重要课题。因此，我们可以从优化教师结构，建立专兼结合师资队伍；完善教学评估体系，建立考核机制；建立激励机制三个方面推动就业指导课程建设。

（一）优化就业指导课程教师结构，建立专兼结合的师资队伍

各高校就业指导课程师资队伍一般由各学院主管就业工作的书记或者副书记，学生工作处教师以及辅导员组成，具有实践经验丰富，专业理论知识薄弱的特点。因此，聘请各高校相关专家、学者、省市人力资源就业服务相关工作人员以及优秀校友整合校内与校外师资，建立专兼结合师资队伍，是促进教师结构的优化，保障就业指导课程质量的重要保障。

（二）完善就业指导课程教学评估体系，建立考核机制。

建立就业指导课程教学评估体系是完善就业指导教育教学质量的推进器，而教学考核机制则是推进就业指导教学评估成效的保障。医学院校要构建“教学队伍评估，教学内容、方法评估，教学管理评估”的就业指导课程评估指标体系，注重师资培训，培养指标建设；注重实践教学指标建设；注重课程规范化指标建设，完善教学考核机制，促进就业指导课程的教学评估。

（三）建立教师激励机制，推进就业指导课程的发展建设

在教师培养与培训方面，高校应给予就业指导任课教师更多的校内外相关内容的培训的机会，将“请进来”、“走出去”相结合，积极开展就业指导培训工作，专家提高任课教师的专业素质；在职称评聘方面，任课教师主要以具有就业指导经验的院系党总支书记或副书记，学生工作处的就业工作负责人以及辅导员为主，学校在职称评聘时予以适当倾斜；在评优政策方面，学校要坚持以“总结表彰促发展建设”为原则，要定期召开就业工作的总结表彰会，其中包括对就业指导课程优秀任课教师的表彰。

三、就业指导课程平台创新化

就业指导课程平台创新化是运用网络资源，建立就业指导课程线上线下教学互动平台，促进就业指导工作的顺利开展。线上平台利用学校网络技术资源构建医学生就业指导网络教学平台，以就业指导课程为中心开展应用研究，参考《大学生职业生涯规划》指导用书，构建“职业生涯规划、创新创业以及就业指导”为内容的就业指导课程网络平台，例如职业测评子模块，在课上或者课下教师均可开展，并根据学生的测评数据和结果分析帮助规划职业生涯。就业指导课程线下平台建设，主要运用慕课、微课以及翻转课堂等形式创新教学模式，构建教师与学生共同参与的教学内容机制，鼓励学生在学习过程中充分发挥自我管理，自主学习的主动性，参与到就业指导课程的教学中，促使就业指导课程更具有创新性，形成就业指导教学过程的良性互动。

四、就业指导课程教学体系化

医学专业的本科阶段学习时间为五年，大致分为四个阶段：认知阶段（大一）―自我定位阶段（大二）―素质养成阶段（大三-大四）―自我提升阶段（大五）。为了构建就业指导课程教学体系化，医学院校可以将就业观念教育、职业生涯规划、职业素质测评、就业心理辅导、创新创业教育等内容与四个阶段统一结合起来，以系统层次的方式分类教学内容，以规范化和精炼化梳理教学计划，完善就业指导课程教学体系化。

（一）认知阶段为新生入学至升入大二前的时期

在这个阶段医学院校肩负着引导帮助新生完成心理转型与重塑、适应高等教育特点、融入大学生活的重要使命。[2]医学院校可以根据学生的特点和结合学生成长的需要开设大学生涯规划与指导类课程，以沈阳医学院基础医学院为例，为新生尽快了解和适应大学生活，在新生入校后开设《大学生活与生涯规划》课程，内容包含：校史校情 、校规校纪 、学习生活指南、理想信念与成长成才四个部分，其中理想信念与成长成才部分可以从初级党校 、专业教育 、感恩教育 、学风建设以及恋爱教育五个方面分别展开讲授，解决新生的适应与发展问题。

（二）自我定位阶段为学生学习生涯步入大二的阶段

?@个阶段学校的重心放在引导学生确定职业目标、职业认知，培养和提高自身综合素质的方面上。医学院校在引导学生自我定位的过程中，要强调“三个结合”：职业目标要与专业学习相结合；职业目标要与能力培养相结合；职业目标要与职业发展要求相结合。学校可以搭建课外社会实践的平台，鼓励学生依托学过的基础医学知识，到社区、敬老院、儿童福利院或者志愿者服务基地进行相关医疗志愿者服务。积极参与各类志愿者服务活动有利于医学生扎实医学基础知识，锻炼职业技能，培养职业情感，建立积极地就业观，定位自身价值。

（三）素质养成阶段为学生学习生涯的大三到大四的阶段

篇（11）

习题课教学的基础是教师精选“好题”，人教社章建跃老师认为好题的标准是：能反映数学本质，与重要的数学概念和性质相关，体现基础知识的联系性，解题方法自然、多样，具有发展性，表述形式简洁、流畅且好懂.

例1 已知函数f（x）=lnx，g（x）=ax2+bx，a≠0.设函数f（x）的图象C1与函数g（x）的图象C2交于点P，Q，过线段PQ的中点作x轴的垂线分别交C1，C2于点M，N，请证明：C1在点M处的切线与C2在点N处的切线不平行.

本题是2005年湖南省高考试题，在导数综合复习时绝对是一道“好题”.本题可以考查导数的几何意义和利用导数研究函数的性质，在讲解此题时，教师不要仅仅是把答案写在黑板上就可以了，这样的教学过程只注重知识的强化，没有锻炼学生的思维和自主解决问题的能力. 在问题给出后，一定要让学生先独立思考，体现出学生的主动性和创造性，使学生独自面对数学问题时能想、能做.

二、交流呈现 展现思维过程

通过学生先行，给学生足够的思考过程，让学生在做题中去感悟，去体会，充分关注学生学习的思维过程. 学生通过自己的思考，展示自己的证法，经整理大致有以下三种方法.

证明：设点P，Q的坐标分别是P（x1，y1），Q（x2，y2），0

（证法一）：假设C1在点M处的切线与C2在点N处的切线平行，则k1=k2. 即=+b，根据等式的特点，两边同乘（x2-x1）得=（[x2][2]-[x1][2]）+b（x2-x1）=（[x2][2]+bx2）-（[x1][2]+bx1）=y2-y1=lnx2-lnx1. 即=，整理得ln=.设t=，则lnt=，t>1. ①. 令r（t）=lnt-，t>1.

通过求导分析得到函数r（t）在[1，+∞）上单调递增. 故r（t）>r（1）=0. 则lnt>. 这与①矛盾，假设不成立. 故C1在点M处的切线与C2在点N处的切线不平行.

（证法二）：同证法一得（x2+x1）（lnx2-lnx1）=2（x2-x1）.因为x1>0，所以（+1）ln=2（-1）.令t=，得（t+1）lnt-2（t-1）=0，t>1. ②

令r（t）=（t+1）lnt-2（t-1），t>1，通过求导分析得到r（t）在[1，+∞）上单调递增.

故r（t）>r（1）=0即（t+1）lnt-2（t-1）>0，这与②矛盾，假设不成立.

（证法三）：令h（x）=lnx-ax2-bx，易知a>0，且h（x1）=h（x2）=0. 图象C1在点M处的切线与图象C2在点N处的切线平行，等价于h′（）=0. 而h′（x）=-ax-b，h′（）=-a（）-b，假设h′（）=0，则有-a（）-b=0===.整理得=，所以ln=.设t=，则lnt=，t>1①， 后面同解法一了.

三、教师断后 透彻分析 拓展延伸

学生在经过自己的独立思考后，教师断后的功能可以使学生的思维得到更进一步的发展. 此时教师可以点评学生的解法，或者提出问题的更优解法，点评问题的通解与巧解的关系，分析问题的本质. 或者把问题拓展推广，从而提高学生分析问题和解决问题的能力.

（一）教师断后 点评学生的解法

证法一和证法二中，都是先假设C1在点M处的切线与图象C2在点N处的切线平行，则k1=k2. 得到=+b，根据等式的特点，两边同乘（x2-x1）得=，同乘（x2-x1）这一步是证法一和证法二的难点，证法一和证法二的区别在于构造了不同的函数，本质上是相同的.

证法三则通过构造函数h（x）=lnx-ax2-bx，把题目中需要研究两个函数的问题转化为研究一个函数的性质就可以了. 图象C1在点M处的切线与C2在点N处的切线平行，等价于h′（）=0.然后根据式子结构特点，把0写成是这种解法的难点.

（二）教师断后 讲解更优的解法

在证法三中，证明了h′（）≠0，由于h（x1）=h（x2）=0.也就是需要证明在区间[x1，x2]上函数h（x）的图象不是关于x=对称的就可以了. 因此可以考虑充分利用导数的几何意义，画出函数h（x）的草图，如图1，从而使问题得证. 教师给出以下解法.

（证法四）：令h（x）=lnx-ax2-bx，易知a>0，且h（x1）=h（x2）=0. h′（x）=-ax-b=，令m（x）=h′（x）=-ax-b，则m′（x）=--a0，所以知函数m′（x）为递增函数，且m（x）为递减函数.

由图2可知，自变量在（x1，x0）上的上升速率要大于区间（x0，x2）上的下降速率，所以x0不可能是区间（x1，x2）的中点. h′（x0）=0，h′（）≠0，所以图象C1在点M处的切线与图象C2在点N处的切线不平行.

这种方法的难点是要对函数进行多次求导，学生要对导数的几何意义灵活运用.

（三）教师断后 讲透问题的实质

前三种证明方法中，都得到了>，那么这个不等式背后的几何意义是什么呢？不等式>的几何背景是：函数f（x）=lnx，A（a，f（a）），B（b，f（b））是函数f（x）图象上不同的两点，且a>b>0，则有f′（）

证明：kAB=，所以要证f′（），只要证ln>，令=t>1，也就是只要证（t+1）lnt-2（t-1）>0，此不等式在证法二中已证明.

（四）教师断后 把问题进行拓展延伸

若把函数f（x）=lnx换为f（x）=mx+n+lnx后，是否仍然有f′（）